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中文摘要
镉是环境中存在的具有极强毒性的重金属污染物,会在生物体的各组织中积累,
导致生殖、免疫、呼吸等系统出现异常或障碍。性别分化阶段的斑马鱼,对环境污
染物非常敏感,极易受到环境的影响,但是镉暴露对幼鱼发育和性别分化的毒性效
28dpf0µmol/L
应尚不清楚。本论文以的斑马鱼幼鱼为研究对象,设置了对照组()
0.11µmol/L0.22µmol/L0.44µmol/L
和低、中、高三个镉浓度组(、、),观察了镉
暴露后斑马鱼幼鱼表型的变化;分析了镉暴露对性别比例和性腺分化的影响;检测
foxl2asox3sox9admrt1gdf9igf3amhar
了性别分化相关基因(、、、、、、、)和关键
nanospiwivasadazl
生殖调控基因(、、、)在斑马鱼不同发育阶段的表达模式,进一
步检测这些基因在镉暴露后表达量的变化。研究结果如下:
1.镉暴露导致斑马鱼幼鱼的发育毒性
与对照组相比,镉暴露导致幼鱼畸形,体长减短,体重减轻,色素沉积减弱,
鱼鳍发育受阻等毒性效应,且镉浓度越高毒性效应越严重,同时镉暴露还造成鱼体
出血并诱导背鳍、臀鳍、肌肉和尾鳍发生细胞凋亡。
2.镉暴露对性别比例和性腺分化的影响
性别统计结果显示,与对照组相比,低中浓度镉暴露后雄性性别比例显著增加。
组织形态学分析显示,各浓度镉暴露后卵巢组织和精巢组织体积均变小,雌性个体
中,中高浓度镉暴露后卵母细胞体积显著变小、数量显著减少,且高浓度镉暴露导
致卵母细胞变形;雄性个体中,精母细胞占比显著增多,卵母细胞占比显著降低,
且高浓度镉暴露导致精巢组织内部出现空隙。
3.镉暴露对性别分化相关基因和关键生殖调控基因表达的影响
半定量结果显示,这些基因在性别分化阶段均表达。与对照组相比,雌性性别
foxl2asox3sox9a
分化基因、在各浓度组表达量均显著下降;雄性性别分化基因在各
浓度组中的表达均显著上调,雄性性别分化基因dmrt1只在低浓度下表达量显著上
调,而在中高浓度组与对照组相比无显著变化。雌性性激素基因gdf9、igf3和雄性性
amhar
激素相关基因、在低中浓度组均无显著变化,而在高浓度组中表达量均显著
nanospiwidazlvasa
下降。关键生殖调控基因、、、在低浓度组中表达量均显著上调,
而dazl、vasa基因在中浓度组无显著变化,但nanos、piwi基因在中浓度组表达量仍
nanosdazlpiwivasa
显著上调,相反、基因在高浓度组中表达量显著下降,而、基因
I
在高浓度组无显著变化。
综上得出以下结论:
1
()镉暴露抑制了幼鱼的生长发育,并造成幼鱼损伤;
(2)镉暴露后幼鱼雄性比例显著升高,性腺发育受阻且组织结构被破坏;
3
()镉暴露后性别分化基因、性激素相关基因和关键生殖调控基因表达异常,
推测这些基因表达量的变化,使性别比例失衡,影响了幼鱼性腺的发育。
关键词:性别分化;发育毒性;性腺;生殖细胞;斑马鱼;镉
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