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二胺氧化酶的检测方法人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中二胺氧化酶(DAO)含量。标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。分光光度法,酶反应体系包括底物戊二胺,催化酶二胺氧化酶和辣根过氧化物酶,邻联二茴香胺和磷酸盐缓冲盐溶液,反应体系pH为7.2,反应温度为37℃,检测波长460nm。第30页,共46页,星期日,2025年,2月5日肠道化学屏障功能障碍长期禁食或全胃肠外营养的患者,因胃肠道处于无负荷状态,使胃酸、胆汁、溶菌酶、粘多糖、水解酶等物质减少,部分病人由于持续胃肠吸引也可使其大量丢失,导致肠道化学屏障破坏,引起化学杀菌作用减弱,从而促进外籍菌的优势繁殖。第31页,共46页,星期日,2025年,2月5日肠道生物屏障功能障碍
肠道细菌在肠腔内形成一个多层次的生物屏障,深层菌紧贴肠腔黏膜,比较稳定,被称为膜菌群,主要为厌氧的双歧杆菌和乳酸杆菌;表层多为大肠杆菌和肠球菌,被称为腔菌群,这些细菌相互之间构成复杂的生态平衡,防止致病菌在肠黏膜定植。长期、大量应用广谱抗生素、肠动力障碍或免疫力低下等均可破坏正常菌群的生态平衡。第32页,共46页,星期日,2025年,2月5日肠道免疫屏障功能障碍肠道免疫相关性疾病继发性免疫缺陷第33页,共46页,星期日,2025年,2月5日第1页,共46页,星期日,2025年,2月5日??????肠道屏障的概念
肠道是机体与外界直接发生联系的组织之一。肠道不断地遭受各种抗原刺激物(如食物蛋白、细菌及其降解物等)的损伤,所以肠道既有超强的抗损伤能力,又有阻碍各种有害物质进入机体的机能。我们将肠道的这种屏障作用称为肠道屏障(gutbarrier)。第2页,共46页,星期日,2025年,2月5日正常肠道屏障的组成及功能肠道屏障主要由机械屏障、生物屏障、化学屏障及免疫屏障组成。由于肠道具有较为完善的防御功能,使机体内环境保持相对稳定,从而维持了机体的正常生命活动。第3页,共46页,星期日,2025年,2月5日机械屏障组成肠黏膜上皮细胞、上皮细胞侧面的细胞连接、上皮基膜及上皮表面的菌膜。功能防止肠腔的大分子物质向肠壁渗透、肠壁固有层的物质进入肠腔。第4页,共46页,星期日,2025年,2月5日菌膜存在于上皮细胞上的肠道细菌特异性受体使定植于肠内的常驻菌有序地嵌入上皮细胞间,构成有层次的菌膜结构,能有效地阻止细菌穿透粘膜进入深部组织。第5页,共46页,星期日,2025年,2月5日化学屏障组成胃酸、胆汁、溶菌酶、粘多糖、水解酶等。功能灭活病原微生物;润滑作用以保护肠黏膜免受物理化学损伤。第6页,共46页,星期日,2025年,2月5日生物屏障组成厌氧菌、需氧菌与兼性厌氧菌,绝大多数都是厌氧菌。功能具有定植性、繁殖性、排他性以防止外籍菌侵入和定植;增强免疫;营养作用。第7页,共46页,星期日,2025年,2月5日肠道细菌正常机体的肠道内栖居着大量细菌,至少在400种以上,占大便湿重的20~30%其中绝大部分是厌氧菌,超过需氧菌的1000倍。正常情况下,正常菌群之间保持着相当稳定的比例关系。肠道常驻菌与宿主的微空间结构,形成一个相互依赖、相互作用的微生态系统,它们与肠道粘膜结合、或粘附、或嵌合,形成有一定规律的膜菌群构成了生物屏障。第8页,共46页,星期日,2025年,2月5日免疫屏障组成肠相关淋巴组织及肠黏膜表面的主要体液免疫成分—分泌型免疫球蛋白。功能对黏膜表面的抗原具有摄取、处理、呈递作用。第9页,共46页,星期日,2025年,2月5日肠相关淋巴组织肠是人体最大的免疫器官之一。肠相关淋巴组织包括:peyer斑、肠系膜淋巴结、浆细胞、B细胞和T辅助淋巴细胞。peyer斑表面覆有一层经过特殊分化的膜细胞-M细胞,M细胞在摄取和处理肠腔内的细菌抗原后将其传递给下层的淋巴细胞,促使后者分化为T、B淋巴细胞。第10页,共46页,星期日,2025年,2月5日分泌性免疫球蛋白(SIgA)来源:主要来源于固有层的浆细胞,少部分来自血清。结构:SIgA是复合物,由一个分子IgA二聚体、一分子分泌片段和一个J链组成。第11页,共46页,星期日
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