酶的作用机制.ppt

3个极性残基：His57、Asp102和Ser195在活性部位形成催化三联体。第30页，共64页，星期日，2025年，2月5日胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶的底物结合口袋决定了各自的专一性。Back第31页，共64页，星期日，2025年，2月5日胰凝乳蛋白酶机制可以通过人工合成底物——简单的有机酯进行研究。第32页，共64页，星期日，2025年，2月5日胰凝乳蛋白酶同乙酸－p－硝基苯酯反应的动力学曲线第33页，共64页，星期日，2025年，2月5日胰凝乳蛋白酶的机制分两个阶段：第一步是乙酰复合体的形成，称为酰化作用。第二步是乙酰复合体通过水解再生为游离的酶，称为脱酰作用。Back第34页，共64页，星期日，2025年，2月5日胰凝乳蛋白酶中的催化三联体。Back第35页，共64页，星期日，2025年，2月5日丝氨酸蛋白酶的催化机制第36页，共64页，星期日，2025年，2月5日胰蛋白酶的催化机制Back第37页，共64页，星期日，2025年，2月5日9.4、酶活性的调控机制酶活性的调节可以通过改变其结构而使其催化活性发生改变，也可以通过改变其含量来改变其催化活性，还可以通过以不同形式的酶在不同组织中的分布差异来调节代谢活动。第38页，共64页，星期日，2025年，2月5日（一）酶结构的调节通过对现有酶分子结构的影响来改变酶的催化活性。这是一种快速调节方式。别构调控酶原激活共价调控Next第39页，共64页，星期日，2025年，2月5日别构调控酶分子的非催化部位与某些化合物非共价结合后发生构象的改变，进而改变酶活性状态，称为酶的别构调节（allostericregulation）。具有这种调节作用的酶称为别构酶（allosericenzyme）。凡能使酶分子发生别构作用的物质称为效应物（effector）或别构剂。因别构导致酶活性增加的物质称为正效应物（positiveeffector）或别构激活剂，反之称为负效应物（negativeeffector）或别构抑制剂。第40页，共64页，星期日，2025年，2月5日当别构酶的一个亚基与其配体（底物或别构剂）结合后，能够通过改变相邻亚基的构象而使其对配体的亲和力发生改变，这种效应就称为别构酶的协同效应。别构剂一般以反馈方式对代谢途径的起始关键酶进行调节，常见的为负反馈调节。ABCDPE1E2E3En第41页，共64页，星期日，2025年，2月5日别构酶的基本性质别构酶一般是寡聚酶，通过次级键由多亚基构成。因别构酶有协同效应，故其[S]对v的动力学曲线不符合米氏方程。效应物可分为K型和V型两种类型。别构酶经加热或化学试剂处理，可引起别构酶解离，失去调节活性，称为脱敏作用。第42页，共64页，星期日，2025年，2月5日多亚基调节亚基催化亚基协同效应别构激活剂别构抑制剂正协同负协同Back第43页，共64页，星期日，2025年，2月5日别构酶的动力学[S]对v的动力学曲线不是双曲线，而是S形曲线（正协同）或表观双曲线（负协同），两者均不符合米氏方程。2米氏曲线1负协同3正协同321V0[S]V第44页，共64页，星期日，2025年，2月5日饱和比值（Rs）可用来鉴别不同的协同作用以及协同的程度。典型的米氏类型的酶Rs=81具有正协同效应的别构酶Rs81，Rs正协同效应具有负协同效应的别构酶Rs81，Rs负协同效应第45页，共64页，星期日，2025年，2月5日第1页，共64页，星期日，2025年，2月5日9.1、酶的活性部位（一）基本概念：酶的活性中心是指结合底物和将底物转化为产物的区域，通常是相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。酶的活性中心包括两个功能部位：结合部位和催化部位。1．结合部位（Bindingsite）酶分子中与底物结合的部位或区域一般称为结合部位。此部位决定酶的专一性。2．催化部位（catalyticsite）酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位。此部位决定酶所催化反应的性质。第2页，共64页，星期日，2025年，2月5日（二）酶活性部位的特点1.活性中心只占酶分子总体积的很小一部分，往往只占整个酶分子体积的1%-2%。2.酶的活性部位是一个三维实体，具有三维空间结构。3.酶的活性部位并不是和底物的形状正好互补的，而是在酶和底物的结合过程中，底物分子或酶分子、有时是两者的构象同时发生了一定的变化后才互补的，此时催化基团的位置正好处在所