园艺植物遗传育种 课件 第九章 现代生物技术育种.ppt

③不需要对育种材料进行接种试验，可同时对几个性状进行选择，而用传统的方法对几个表现时期不同的性状很难同时进行直接选择。例如在回交育种过程中，随着有利基因的导入，与有利基因连锁的不利基因（或染色体片段）也会随之导入，成为连锁累赘。利用与目的基因紧密连锁的ＤＮＡ标记，可以选择在目的基因附近发生重组的个体，显著减少连锁累赘，提高选择的效率。利用分子标记辅助选择，首先要将目的基因进行精细定位。在不同的群体中，标记之间的遗传距离会有所变化，所以要在所研究的材料中根据已发表的资料重新对基因进行定位。目的基因和标记的遗传距离应不大于10ｃＭ，然后以标记的基因辅助选择。近年来，应用分子标记建立品种的指纹图谱已用于品种纯度的鉴定，该方法在幼苗或种子阶段就可鉴定出品种纯度。品种纯度的鉴定可以消除同物异名、同名异物的现象，确定保护种质资源遗传完整性的最小繁种群体和最小保种量，进行核心种质筛选和种质资源的分类等。9.5.2.5种质资源及品种鉴定此外，利用相同分子标记进行不同物种间ＱＴＬ的比较作图，也已在茄科（番茄、马铃薯、辣椒等）和十字花科（拟南芥菜、甘蓝、花椰菜、油菜等）等的物种之间进行，并从中发现了物种间标记图谱与ＱＴＬ图谱的相似性，即发现了不同物种的共线性（不同物种中一致的基因位置和排序现象），由此可预测一些重要ＱＴＬ在不同物种中的位置，从已知物种基因来推知另一物种的同源基因的位置和功能，通过ＱＴＬ图谱的比较追溯物种的进化过程，并开拓新种质资源。这对于作物的重要农艺性状基因克隆和分子标记育种极为有利。随着生物技术领域中的植物基因组学（genomics，指对基因组作图、测序及分析的学科，主要涉及结构基因组学、功能基因组学和比较基因组学）和生物信息学（bioinformatics,涉及生物信息的获取、处理、储存、分发、分析和解释等所有方面，以阐明和理解大量数据所包含的生物学意义为目标的一门学科）的兴起，生物技术在园艺植物育种领域的应用前景将更广阔，它对推动园艺植物育种事业发展的作用将会更大。练习与思考１．什么是生物技术？２．遗传信息是怎样在生物上、下代之间传递的？３．基因工程在园艺植物育种中的应用主要体现在哪些方面？４．你对转基因植物的生物安全性是怎样理解的？５．细胞工程主要涉及哪些内容？６．怎样开展突变细胞的筛选？７．请简述体细胞杂交的步骤。８．请分析花药培养与花粉（小孢子）培养的异同。９．请分析分子标记的主要应用。本章小结*9.4.2.1花药培养在离体培养条件下，要使花药中的花粉改变其正常发育方向而形成单倍体植株，需要各种因素来共同调节和控制。外因方面与培养基成分、植物生长调节剂种类、糖浓度、培养温度和光照有关；内因主要决定于花药中花粉发育的时期，最适宜的时期因植物种类和品种而不同，一般从单核早期到双核期。此外，供体植株的生长条件和植株年龄也会影响花药的培养。在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的植株，常有倍性变异。形成非单倍体的原因有核融合、不正常的非单倍体花粉诱导生长、花药壁和花丝等参与愈伤组织的形成等。为此，可采取花粉培养方法或控制激素水平，抑制体细胞组织的发育而促进小孢子的发育。9.4.2.2花粉（小孢子）培养花药中的小孢子母细胞通过减数分裂形成小孢子，小孢子核分裂形成生殖细胞和营养细胞后成为雄配子体，即成熟花粉。通常我们把小孢子和雄配子体统称为花粉。花粉培养实际上包括单核期花粉培养、双核期花粉培养和成熟花粉培养３种。严格地讲，小孢子只包括四分体解离后至第１次核有丝分裂时期的细胞，“小孢子培养”单指单核期花粉培养。但是，在培养工作中，由于花粉培养以小孢子培养为主，有时也将花粉培养与“小孢子培养”通用，将双核期花粉培养甚至成熟花粉培养等统称为“游离小孢子培养”。花粉培养主要应解决好花粉的分离及其培养两个环节。分离花粉的方法有机械分离法和自然散落法两种。常用的花粉培养方法主要有浅层液体培养法、看护培养法、平板培养法和微室悬滴培养法。花粉培养与花药培养的最大区别在于，它是将花粉从花药中分离出来，以单个花粉粒作为外植体进行离体培养的技术。因此花粉培养具有下列优点：①可避免花药培养过程中因存在有害物质出现阻遏小孢子启动第１次分裂的问题，使小孢子胚胎及其再生植株的产量远高于花药培养；②无论是经愈伤组织或胚状体，最终获得的小植株均为单倍体或双单倍体，从遗传学上而言均是纯合植株；③小孢子培养可观察由单细胞到雄核发育的全过程，诱变处理时，花粉能均匀地接触化学和物理诱变剂，可揭示花粉吸收、转化和诱变机制，因此它可作为遗传与发育及诱变