艾滋病实验室检查PPT.ppt

关于艾滋病实验室检查PPT第1页，共19页，星期日，2025年，2月5日*实验室检查第2页，共19页，星期日，2025年，2月5日*免疫学检测AIDS患者正常(×109/L)CD40.21(0.8～1.2)CD4/CD811.2～2.1淋巴细胞总数12～3流式细胞仪测定第3页，共19页，星期日，2025年，2月5日*血清学检测（１）HIV抗体的初筛试验——ELISA（酶联免疫试验）第4页，共19页，星期日，2025年，2月5日*血清学检测（２）HIV抗体的确证试验——Westernblot（免疫印迹试验）第5页，共19页，星期日，2025年，2月5日*血清学检测（３）HIV抗原检测——ELISA夹心法测定p24抗原敏感性很高（7～10pg/ml）特异性稍差（可有假阳性）第6页，共19页，星期日，2025年，2月5日*分子生物学检测（1）HIVRNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应）PCR：高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30个循环，成倍数扩增荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR查血浆中的病毒RNA第7页，共19页，星期日，2025年，2月5日*分子生物学检测（2）淋巴细胞HIVRNA检测——Northern印迹杂交(Northernblot)原理：RNA片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交第8页，共19页，星期日，2025年，2月5日*分子生物学检测（3）HIV变异株检测——Sanger测序法原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的PAGE胶上电泳，获得DNA序列第9页，共19页，星期日，2025年，2月5日*病毒检测血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV操作复杂，主要用于科研第10页，共19页，星期日，2025年，2月5日*诊断第11页，共19页，星期日，2025年，2月5日*诊断原则流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。临床表现：高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现，颈、腋及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。无症状期、艾滋病期临床表现。实验室检查：①HIV抗体阳性，并经确证试验确认。②CD4+T淋巴细胞数明显减少。③HIVRNA和P24抗原的检测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。第12页，共19页，星期日，2025年，2月5日*诊断标准急性期★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性无症状期★流行病学史、HIV抗体阳性★仅实验室检查HIV抗体阳性第13页，共19页，星期日，2025年，2月5日*诊断标准艾滋病期★流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列一项或以上：1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻超过4周；3.持续或间歇发热超过4周；4.全身淋巴结肿大；5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮炎；8.反复发生的败血症；9.深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；10.肺孢子虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑病。13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症；15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。ⅠⅠ第14页，共19页，星期日，2025年，2月5日