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2025年江苏省职业院校技能大赛生物技术赛项样题
（高职组、教师组）
模块一：磁珠法提取鸡血中DNA
（共1题，总分：100分，时间：100分钟）
1.考核题目
取120μL鸡全血稀释液，利用磁珠法分离纯化高质量DNA（完成3次平行
实验），并通过超微量分光光度计对其进行DNA浓度与纯度测定（每个样品测
定1次），计算平均值和相对标准差，并进行实验记录和数据分析，完成结果报
告。
DNA浓度与纯度检测结果计算公式：
（1）DNA浓度计算
根据三个样品超微量核酸蛋白分析仪显示浓度的平均值计算样品中的DNA
浓度（μg/mL）（小数点后保留2位）。
（2）DNA纯度检测（小数点后保留2位）
OD260/OD280比值应为1.70至1.90。
（3）相对标准差计算公式（小数点后保留1位）
根据三个样品DNA含量测定值，计算出RSD。
式中：—三个样品DNA含量测定值的平均值，单位为纳克每微升（ng/μL）
n—平行样品个数；x—每个样品的测定值。
i
2.考核内容
1120μL2mL
（）取鸡血样品至离心管中。
（2）加入20μL蛋白酶K溶液。
（3）加入300μL裂解液GHL，振荡混匀。
46515min33-5
（）将离心管置于℃金属浴中孵育，期间颠倒混匀回，每回次。
55min
（）室温放置。
（6）加入350μL异丙醇，振荡混匀10秒。
（7）加入20μL磁珠悬浮液，振荡混匀1min，共静置9min，每3min振荡混匀
1min。
（8）将离心管置于磁力架静置30秒，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
（9）将离心管从磁力架上取下，加入700μL缓冲液GDA，振荡混匀5min。
1030
（）将离心管置于磁力架上静置秒，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
（11）如需获得较高的DNA纯度，可选择重复步骤（9）和（10），由选手自定。
（12）将离心管从磁力架上取下，加入700μL漂洗液PWD，振荡混匀2min。
1330
（）将离心管置于磁力架静置秒，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
（14）重复步骤（12）和（13）
（15）将离心管置于磁力架上，室温晾干一定时间。
16100μLTB
（）将离心管从磁力架上取下，加入洗脱缓冲液（★此步骤开始前
需向裁判举手示意），振荡混匀，置于56℃金属浴中，孵育10min，期间颠倒混
匀3回，每回3-5次。
172minDNA
（）将离心管置于磁力加上静置，磁珠完全吸附后，小心将溶液
转移至一个新离心管中。
（18）输入考试编号“场次号+赛位号”，用超微量核酸蛋白分析仪检测DNA含
量和纯度，并打印检测数据单。
3.考核要求
实验前仪器材料准备和检查工作，填写实验仪器材料检查确认单。考核开始
后，需要穿戴实验工作服（帽子、口罩、衣服、鞋套）、手套，做好实验准备。
实验操作全程熟练掌握移液器使用。使用磁珠法提取鸡血DNA，安全、稳
定完成裂解、结合、洗涤、洗脱等各步骤操作。熟练使用涡旋仪、磁力架、金属
浴、超微量核酸蛋白分析仪等仪器设备。
准确记录仪器测定数据，并将打印数据贴于报告单指定位置；计算相对标准
差（使用赛场提供的计算器），完成实验报告等。
还原比
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