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嗜热玫瑰红球菌来源谷氨酰胺酶的重组表达与研究
目录
内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.2研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.3文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
2.1.1嗜热玫瑰红球菌菌株．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.1.2质粒和宿主细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.2基因克隆与构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
2.2.1目标基因的选择与克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
2.2.2载体构建与验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
2.3重组蛋白的表达系统优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.3.1表达载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.3.2诱导表达条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
2.4重组蛋白的纯化与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.4.1亲和层析纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
2.4.2酶活性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
嗜热玫瑰红球菌来源谷氨酰胺酶的性质分析．．．．．．．．．．．．．．．．．23
3.1酶的理化性质．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
3.1.1最适温度和pH值．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
3.1.2稳定性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
3.2酶的催化特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
3.2.1底物特异性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
3.2.2动力学参数．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
嗜热玫瑰红球菌来源谷氨酰胺酶的生物学功能研究．．．．．．．．．．．31
4.1生物学功能初步探索．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
4.1.1对不同氨基酸的转化作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
4.1.2代谢途径分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
4.2嗜热玫瑰红球菌来源谷氨酰胺酶的生物合成途径研究．．．．．．．．35
4.2.1关键酶的鉴定与功能分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
4.2.2生物合成途径的调控机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
嗜热玫瑰红球菌来源谷氨酰胺酶的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．40
5.1工业应用潜力．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
5.1.1食品工业中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
5.1.2医药领域的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
5.2环境影响评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
5.2.1环境友好性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
5.2.2潜在的生态效应．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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