重组DNA技术的基本工具（教学课件）高二生物（人教版2019选择性必修3）1.pptx

选择性必修三《生物技术与工程》;我国是棉花的生产和消费大国。棉花在种植过程中，常常会受到一些害虫的侵袭，其中以棉铃虫最为常见。;P67;1.为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？;科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，可以抵御番木瓜环斑病毒。;培育抗番木瓜环斑病毒的木瓜;目录;;;5.切割结果;实例2——SmaⅠ限制酶;问题1.请写出下列限制酶切割形成的黏性末端。;2.结合右图，推断限制酶切一次可断开个磷酸二酯键，

产生个游离的磷酸基团，消耗分子水。;5.推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么？;想一想：把两种来源不同的DNA进行重组，应该怎样处理？;1.作用：;3.E·coliDNA连接酶的缝合作用;DNA连接酶作用部位？;T4DNA连接酶还可以把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率相对较低。;二;二;【核心归纳】与DNA相关的几种酶的比较;思考：根据所学知识，完成以下填空：

①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶⑤RNA聚合酶;1.作用：;3.最常用的载体——质粒;;;现有一段DNA，含有g1、g2、g3，若要将g2提取出来，如何操作？;;1.剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具”？;;;;;;;;;在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%),静置2~3min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸去上面的水分;或者将溶液倒入塑料离心管中,在10000r/min的转速下离心5min,弃上清液,将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干。;（4）DNA的鉴定;5.结果分析;;刑侦破案;限制酶;1．细菌中广泛存在限制性内切核酸酶，当有外来DNA入侵时，该酶能够识别入侵者双链DNA中特定核苷酸序列并将其水解。以下相关叙述正确的是()

A．含有限制性内切核酸酶的细菌以RNA为遗传物质

B．细菌中含有多种细胞器

C．该酶可以保护细菌不受某些DNA病毒等的感染

D．含有限制性内切核酸酶的细菌自身的DNA也能被该酶水解;2.图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性内切核酸酶切割的碱基序列和酶???位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：;

(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T—A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有_____种不同DNA片段。

(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是____________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加___________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是________________________________________________________。