人教版教学课件基因工程的基本操作程序.pptVIP

一.2基因工程的基本操作程序DUCK179制作复习:基因工程的基本操作步骤提取目的基因，目的基因与运载体结合，将目的基因导入受体细胞，目的基因的表达和检测看课本P8的图DUCK179制作目的基因：主要指的是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子获取方法：从基因文库中获取目的基因。人工合成例:利用PCR技术扩增目的基因DUCK179制作一、目的基因的获取从基因文库中获取目的基因①、什么叫基因文库？将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库基因文库基因组文库部分基因文库（cDNA文库）DUCK179制作基因组文库与部分基因文库的关系DUCK179制作基因文库的构建模式图通过对受体菌的培养而储存基因DUCK179制作12如何从基因文库中得到所需要的基因？依据：目的基因的有关信息。如：根据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特性。DUCK179制作PCR:聚合酶链式反应：是以DNA变性、复制的某些特性为原理设计的前提条件是必须对目的基因有一定的了解，需要设计引物。DUCK179制作12③利用PCR技术扩增目的基因PCR技术原理及反应过程原理：1DNA双链复制2DUCK179制作31加热至90～95℃目的基因DNA解链42冷却至55～60℃，引物结合到互补DNA链53加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从从引物起始互补链的合成反应过程：6DUCK179制作1、基因表达载体的组成思考：作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？基因表达载体的构建复制原点目的基因启动子终止子标记基因等DUCK179制作启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质调节基因操纵基因结构基因RNA聚合酶半乳糖苷酶酶酶RNA聚合酶启动子结构蛋白基因RNA聚合酶DUCK179制作终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录1标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来2DUCK179制作3总结：表达载体需由哪几部分组成DUCK179制作它们的作用是？复制原点启动子目的基因终止子标记基因DUCK179制作哪些细胞可以作为目的基因的受体？导入植物细胞常用的方法是什么？具体过程是怎样的？导入动物细胞常用的方法是什么？基本操作程序是怎样的？导入大肠杆菌的方法是怎样的？钙离子有什么作用？三、目的基因导入受体细胞