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病原微生物核酸检测试题（附答案）

一、单选题（每题2分，共60分）

1.以下哪种方法不属于病原微生物核酸检测的常规方法？（）

A.聚合酶链反应（PCR）

B.酶联免疫吸附测定（ELISA）

C.核酸杂交技术

D.基因测序技术

答案：B

解析：ELISA是用于检测抗原或抗体的免疫学方法，并非核酸检测方法，而A、C、D选项均为常见的病原微生物核酸检测方法。

2.进行PCR反应时，不需要的成分是（）

A.模板DNA

B.dNTP

C.引物

D.抗体

答案：D

解析：PCR反应需要模板DNA作为扩增的起始物质，dNTP是合成新DNA链的原料，引物用于引导DNA聚合酶结合到模板上开始扩增，而抗体与PCR反应无关。

3.实时荧光定量PCR技术中，荧光信号产生的原理是（）

A.荧光染料与双链DNA结合发出荧光

B.荧光抗体与抗原结合发出荧光

C.荧光素酶催化底物发光

D.荧光标记的引物与模板结合发光

答案：A

解析：实时荧光定量PCR中常用的荧光染料（如SYBRGreen）能与双链DNA结合，结合后发出荧光，随着PCR扩增双链DNA增多，荧光信号增强。B选项是免疫学检测原理；C选项与实时荧光定量PCR原理不同；D选项荧光标记引物结合模板不是主要的荧光信号产生方式。

4.核酸提取过程中，使用氯仿的主要作用是（）

A.裂解细胞

B.沉淀核酸

C.去除蛋白质

D.溶解核酸

答案：C

解析：氯仿能使蛋白质变性并将其从核酸溶液中分离出来，起到去除蛋白质的作用。裂解细胞一般用裂解液；沉淀核酸常用异丙醇或乙醇；核酸可溶解于适当的缓冲液中。

5.以下哪种病毒的核酸类型为RNA？（）

A.乙肝病毒

B.疱疹病毒

C.流感病毒

D.人乳头瘤病毒（HPV）

答案：C

解析：流感病毒是RNA病毒，其遗传物质为RNA。乙肝病毒、疱疹病毒、HPV均为DNA病毒。

6.在核酸检测中，内参基因的作用是（）

A.增加检测的灵敏度

B.监控核酸提取和扩增过程的有效性

C.区分不同的病原微生物

D.提高检测的特异性

答案：B

解析：内参基因是样本中恒定表达的基因，通过检测内参基因可以判断核酸提取是否成功以及扩增过程是否正常，从而监控整个检测流程的有效性。它并不能直接增加检测灵敏度、区分不同病原微生物或提高检测特异性。

7.逆转录PCR（RT-PCR）主要用于检测（）

A.DNA病毒

B.RNA病毒

C.细菌

D.真菌

答案：B

解析：RT-PCR是先将RNA逆转录为cDNA，再进行PCR扩增，主要用于检测RNA病毒，因为RNA病毒的遗传物质是RNA。DNA病毒、细菌、真菌的检测一般可直接用普通PCR针对其DNA进行检测。

8.以下关于核酸探针的描述，错误的是（）

A.可以是DNA片段

B.可以是RNA片段

C.必须带有放射性标记

D.能与互补核酸序列特异性结合

答案：C

解析：核酸探针可以是DNA片段或RNA片段，能与互补核酸序列特异性结合。探针的标记方式有多种，除了放射性标记外，还可以用荧光标记、酶标记等，并非必须带有放射性标记。

9.基因测序技术中，桑格测序法的基本原理是（）

A.基于DNA合成过程中加入双脱氧核苷酸终止链的延伸

B.基于DNA分子在电场中的迁移速度不同

C.基于DNA与蛋白质的相互作用

D.基于核酸杂交技术

答案：A

解析：桑格测序法是在DNA合成过程中加入双脱氧核苷酸（ddNTP），当ddNTP掺入到正在合成的DNA链中时，由于其3端没有羟基，不能继续进行链的延伸，从而终止DNA合成，通过电泳分析不同长度的DNA片段来确定碱基序列。B选项是电泳分离DNA的原理；C选项与桑格测序法原理无关；D选项核酸杂交技术与桑格测序法原理不同。

10.进行核酸检测时，样本采集的部位对于检测结果至关重要。对于呼吸道病毒检测，常用的样本采集部位是（）

A.血液

B.粪便

C.咽拭子或鼻拭子

D.尿液

答案：C

解析：呼吸道病毒主要存在于呼吸道黏膜表面，咽拭子或鼻拭子可以采集到呼吸道的分泌物，是检测呼吸道病毒常用的样本采集部位。血液一般用于检测全身性感染或病毒血症时的病毒；粪便主要用于检测肠道病毒；尿液一般较少用于呼吸道病毒检测。

11.在核酸扩增反应中，变性温度一般设置为（）

A.50-60℃

B.72℃

C.94-98℃

D.37℃

答案：C

解析：变性是指将双链DNA解链为单链的过程，需要较高的温度，一般在