BDSF与细胞外囊泡载药体系促血管再生及其在组织修复中的应用研究.pdfVIP

摘要

血管再生不仅是维持体内正常生理稳态的重要生物事件，同时也是促进损伤组织修复和

再生的关键因素。由创伤或疾病（如缺血性脑中风）引发的血管阻断可导致组织缺血，抑制

组织再生，进而对机体功能造成不可逆的损害。因此，亟需开发促进缺血部位血管再生、加

速损伤组织修复的治疗技术。

传统促血管再生疗法存在毒副作用高、治疗靶向性低和药物富集量不足等缺陷，极大限

制了其临床治疗效率。此外，生物活性纳米材料存在载药量和包封率高、制备方法温和、毒

性低和体内循环时间长等优点，作为载药体系具有增强血管再生性能的潜力。生物活性纳米

材料不仅能够克服单一治疗模式的不足，同时能够保留每种治疗方式的优势，可通过多种途

径对多个靶点进行综合调控，更有利于促进血管再生，减少毒副作用，提高治疗效果，为传

统促血管再生疗法提供了解决方案。

顺式-2-十二碳烯酸（cis-2-dodecenoicacid，BDSF）是一种细菌分泌的群体感应信号分子，

是细胞间信息交流的重要媒介。本研究发现，BDSF能够通过影响Notch信号通路、调节线粒

体和核糖体的功能和减少细胞自噬水平调控内皮细胞的增殖、迁移，是一种有前景的促血管

再生生物活性小分子。此外，BDSF来源简单、提取容易、成本廉价，具有加速损伤组织修复

的能力，存在治疗缺血性疾病的潜力。

细胞外囊泡是一种天然来源的脂质囊泡，其内富含大量的蛋白质、核酸和代谢产物，不

仅是组织修复的活性因子，同时也是一种性能优异的载药体系。细胞外囊泡具有给药方便、

免疫原性低和易于内化等优点。此外，细胞外囊泡可以跨越各种生物屏障（如血脑屏障），进

行药物的精准高效输送。近年来的研究表明，细胞外囊泡在免疫调节和为组织修复创造有利

的免疫微环境等方面具有巨大优势。

本论文设计基于细胞外囊泡的载药体系，用于促血管再生及组织修复研究，主要内容包

括以下三个部分：

1.细菌群体感应信号分子BDSF的促血管再生性能研究

探究BDSF对内皮细胞功能的影响及生物机制。BDSF在浓度为20μM时，显著促进内

皮细胞增殖和迁移，从而加速内皮细胞的血管再生过程。mRNA组学测序分析显示，BDSF处

理的内皮细胞表现出显著的差异基因表达。其中，有797个基因显著上调，有764个基因显

著下调。BDSF通过影响内皮细胞的生物学过程、细胞组分和分子功能等方面调控内皮细胞

的血管再生机制。实时定量聚合酶链式反应结果显示，BDSF显著降低与自噬相关的

MAP1LC3B2、RTN4R基因的表达。BDSF显著增强与内皮细胞的增殖和迁移相关的

NOTCH2NLR、CSNK2A3、TSPAN8基因的表达。同时，BDSF增强线粒体和核糖体的功能

相关的NDUFS4、RPL18A基因的表达。因此，BDSF提高内皮细胞的增殖和和迁移能力，进

而加速血管生成过程。

2.基于细胞外囊泡的BDSF载药体系促血管再生及其在缺血性脑中风治疗中的应用研究

开发基于M2型小胶质细胞来源的细胞外囊泡的BDSF载药体系，用于大鼠缺血性脑中

风治疗研究。通过超速离心收集M2型小胶质细胞来源的细胞外囊泡（EV），并采用超声孵育

的方法将BDSF负载到EV中，获得BDSF@EV。BDSF@EV在体外表现出三种功能：（1）

促进内皮细胞的血管生成；（2）小胶质细胞极型的转变；（3）保护神经元免受缺氧和炎症损

伤。此外，BDSF@EV对受损的内皮细胞和颈动脉表现出一定的粘附功能。为了克服血脑屏

障并减少代谢清除作用，将BDSF@EV制备成一种生物学喷雾，采用鼻腔给药的方式，在大

鼠中动脉闭塞模型中验证BDSF@EV的作用效果。结果发现，BDSF@EV能够有效地在脑缺

血部位富集，靶向修复脑损伤血管，实现脑组织的修复和神经功能的恢复。

3.生物活性细胞外囊泡墨水在伤口愈合中的应用研究

发展一种便携式组织愈合生物活性墨水（PANIT），用于促进血管再生和创面愈合。该便

携性墨水由具有生物活性的M2型巨噬细胞来源的细胞外囊泡（EVM2）和海藻酸钠水凝胶前

驱体构建。EVM2和海藻酸钠水凝胶前驱体在混合后形成EVM2-Gel墨水。与3D打印笔的进

一步集成使得EVM2-Gel墨水能够原位涂抹在伤口上，以适配不同的伤口外貌形态。EVM2-Gel

墨水可促进