病毒感染的检查方法与防治原则.ppt

(四)新病毒的鉴定核酸类型的测定理化性状的检测形态学鉴定血清学鉴定基因测序和生物对比第31页，共44页，星期日，2025年，2月5日关于病毒感染的检查方法与防治原则第1页，共44页，星期日，2025年，2月5日第一节病毒感染的检查第2页，共44页，星期日，2025年，2月5日病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体病毒颗粒病毒抗原病毒核酸病毒酶类：如逆转录酶电镜直接观察光镜检查包含体分离培养第3页，共44页，星期日，2025年，2月5日一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：1.标本用“双抗”或两性霉素B处理2.低温保存，尽快送检3.血清学诊断采双份血清第4页，共44页，星期日，2025年，2月5日二、病毒的分离与鉴定（一）病毒的分离培养细胞培养（cellculture）鸡胚接种（egginoculation）动物接种（animalinoculation）第5页，共44页，星期日，2025年，2月5日二、病毒的分离与鉴定一般程序：标本无菌处理动物接种鸡胚培养细胞培养指标阳性指标阴性病毒鉴定盲传2～3代指标阴性病毒阴性第6页，共44页，星期日，2025年，2月5日（一）病毒的分离培养1.细胞培养单层细胞培养（monolayercellculture）分类悬浮细胞培养（suspendedcellculture）原代细胞（primarycell）细胞种类二倍体细胞（diploidcell）传代细胞系（continuouscellline）第7页，共44页，星期日，2025年，2月5日病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞第8页，共44页，星期日，2025年，2月5日1.细胞培养(1)原代和次代细胞培养组织组织块分散的单个细胞单层细胞剪碎培养基(原代细胞)单层细胞(次代细胞)传代培养蛋白酶第9页，共44页，星期日，2025年，2月5日特点：①对多种病毒敏感②生长能力有限,获取成本高③可携带潜伏病毒1.细胞培养(1)原代和次代细胞培养第10页，共44页，星期日，2025年，2月5日(2)二倍体细胞培养体外分裂50～100代仍保持二倍体染色体数目，可用于病毒分离和疫苗生产。特点：①对多种病毒敏感②不带异种蛋白(人源性)③不带病毒，无致瘤潜能④可传50代左右1.细胞培养第11页，共44页，星期日，2025年，2月5日(3)传代细胞培养特点：①对多种病毒敏感性高②繁殖能力高，传代时间长③有致癌危险，不能用于疫苗生产1.细胞培养第12页，共44页，星期日，2025年，2月5日2.鸡胚培养采用孵化9～14天的鸡胚绒毛尿囊膜（allantocherion）痘苗病毒、人类疱疹病毒尿囊腔（allantoiccavity）接种部位流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔（amnioticcavity）流感病毒的初次分离卵黄囊（yolksac）嗜神经病毒第13页，共44页，星期日，2025年，2月5日第14页，共44页，星期日，2025年，2月5日2、鸡胚培养优点：易管理，不带微生物，成本较低缺点：操作程序复杂第15页，共44页，星期日，2025年，2月5日第16页，共44页，星期日，2025年，2月5日3.动物接种应用：尚无敏感细胞的病毒培养动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等优点：结果易观察，可建立动物模型缺点：有饲养条件要求，费用高，动物体内常带有潜伏病毒第17页，共44页，星期日，2025年，2月5日1．病毒增殖鉴定(1)细胞病变效应（cytopathiceffect,CPE）①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）；②形