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赤霉素检测方法

1、原理

试样经甲醇提取、浓缩并净化后，用高效液相色谱法检测，外标法定量。

2、试剂

以下试剂，除特殊说明外，均为分析纯。

1）甲醇：色谱纯。

2）冰乙酸。

3）赤霉素标准品。

4）0.6%冰乙酸溶液：准确称取0.6mL冰乙酸，加水并定容至100mL。

5）0.1mg/mL赤霉素标准液：准确称取0.010g赤霉素标准品于100mL容量瓶中，

用流动相溶解并定容至刻度。

3、仪器

高效液相色谱仪：配紫外检测器。

分析天平：感量0.0001g一台。

超声波清洗器。

容量瓶：25mL、100mL。

微孔滤膜：0.45μm。

4、测定

4.1样品制备

准确称取样0.10g，置于25mL容量瓶中，加约20mL甲醇，在超声水浴

中超声20min，用甲醇定容至刻度，放置4h后经0.45μm滤膜过滤，备用。

4.2标品处理

将配制的标准液经0.45μm滤膜过滤，过滤后所得滤液作为对照溶液。

4.3测定

4.3.1色谱条件

色谱柱：C18色谱柱，150mm×4.6mm，5μm，或性能相当者。

流动相：甲醇：0.6%冰乙酸溶液=35：65。

紫外检测器：波长为211nm。

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柱温：30℃。

流速：1.0mL/min。

进样体积：20μL。

4.3.2色谱分析

分别注入20μL赤霉素标准液及试样溶液，按上述列出的条件进行液相色

谱分析测定，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内。根据标准品

的保留时间定性，外标法定量。

4.4结果计算

样品中赤霉素含量（X）以毫克每克（mg/g）表示，按下式计算：

式中：

X：样品中赤霉素含量，单位为毫克每克（mg/g）。

A：样品峰面积。

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c:赤霉素标准液浓度数值，单位为毫克每毫升（mg/mL）。

V：试样体积，单位为毫升（mL）。

A：标品峰面积。

1

M：样品质量，单位为克（g）。

5、方法定量检出限

本方法定量检出限为：2mg/g。

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