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红细胞血型检测*第二节盐水介质实验技术盐水介质试验技术常用于血型鉴定、血清中IgM类抗体的筛查和鉴定、盐水介质的交叉配血等。基本方法1.平板法用于ABO血型和RhD抗原的定型特点:简单、快速,但易污染环境。2.试管法为定型试验方法,也可于半定量试验。是输血前检验最常用的试验方法。特点:简单、快速、易学,结果准确、可靠。3.微孔板法为定性试验方法。第30页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧离心看结果阳性阴性第31页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*第32页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*第三节酶处理实验技术原理:在酶的作用下切断带有负电荷的羧基基团的唾液酸,降低Zeta电位,缩短红细胞之间的距离。增强IgG抗体对红细胞的凝集。常用对的酶:木瓜蛋白酶,菠萝蛋白酶,无花果蛋白酶等第33页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*酶介质配血方法患者献血者主侧次侧主次侧均加酶酶上海市血液中心血第34页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*37℃水浴30分钟?37℃离心看结果阳性阴性?第35页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*结果的判断(1)阳性对照管凝集,阴性对照管不凝集,被检管凝集为阳性,不出现凝集判定为阴性。(2)阳性对照管不凝集和(或)阴性对照管凝集,实验失败分析原因,重新实验。第36页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*第四节抗球蛋白实验技术基本原理抗球蛋白试验(Coombs实验)主要用于检测血清中的不完全抗体如:IgG、IgA和(或)补体如:C3、C4。在盐水介质中,不完全抗体只能致敏红细胞,而不能使红细胞出现可见的凝集反应,加入抗球蛋白试剂后,抗球蛋白分子的Fab片段与红细胞表面的受体结合,而产生红细胞凝集,因此采用此方法可以检测出血清中是否存在不完全抗体。第37页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*抗球蛋白试验原理图第38页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*分类及应用抗球蛋白试验直接间接致敏红细胞的不完全抗体、补体血清中的不完全抗体应用直接:HDN的诊断、AIHADE的诊断、药物诱发型溶血病的诊断间接:交叉配血及血型鉴定、器官移植、等第39页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*抗球蛋白配血方法患者献血者主侧次侧37℃?37℃水浴30分钟三洗第40页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*加抗球蛋白抗球蛋白试剂上海市血液中心血离心看结果阳性阴性第41页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*结果的判断直接抗球蛋白试验:(1)阳性对照管凝集,阴性对照管不凝集,被检管凝集,判定为阳性。(2)阳性对照管凝集,阴性对照管不凝集,被检管不凝集,须做阴性确认后判定结果。(3)阳性对照管不凝集和(或)阴性对照管凝集,结果不可信不能发出报告,分析原因后重做试验。第42页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测红细胞血型检测关于红细胞血型检测第1页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*主要内容输血前免疫学检查盐水介质试验技术酶处理试验技术抗球蛋白试验技术聚凝胺介质试验技术微柱凝集试验技术吸收放散技术凝集试验技术红细胞血型分子生物学检测技术第2页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*第一节输血前免疫学检查目的:使输入的血液成分在受血者的体内发挥其有效作用.在正常情况下,输入的红细胞在受血者体内不溶血,输入的的血浆成分不破坏受血者的红细胞。主要程序:受血者血液标本的处理、ABO血型和RhD血型鉴定、红细胞同种抗体筛查和鉴定、交叉配血。第3页,共60页,星期日,2025年,2月5日红细胞血型检测*一、受血者标本的处理(一)标本的采集
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