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低温暴露对菲律宾蛤仔免疫指标及基因表达影响的机制研究

目录

低温暴露对菲律宾蛤仔免疫指标及基因表达影响的机制研究（1）．．4

内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.1菲律宾蛤仔来源及处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.2实验分组与处理方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2免疫指标检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2.1蛋白酶活性的测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.2.2巨噬细胞吞噬能力的检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2.3抗体产生能力的检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.3基因表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.3.1总RNA的提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.3.2cDNA的合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.3.3RTqPCR技术检测基因表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

3.1低温暴露对菲律宾蛤仔免疫指标的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

3.1.1蛋白酶活性的变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

3.1.2巨噬细胞吞噬能力的改变．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

3.1.3抗体产生能力的分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.2低温暴露对菲律宾蛤仔基因表达的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

3.2.1免疫相关基因的表达变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

3.2.2应激响应相关基因的表达变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

低温暴露影响菲律宾蛤仔免疫指标及基因表达的机制探讨．．．．．33

4.1免疫调节机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

4.1.1蛋白酶活性调节．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

4.1.2巨噬细胞功能调节．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

4.1.3抗体生成调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

4.2基因表达调控机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

4.2.1免疫相关基因的转录调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

4.2.2应激响应基因的调控网络．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

低温暴露对菲律宾蛤仔免疫指标及基因表达影响的机制研究（2）．44

一、内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

二、文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

菲律宾蛤仔生物学特性及免疫系统概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

低温胁迫对海洋生物免疫系统的影响研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

基因表达与免疫响应的关系研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

三、研究方法与实验