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AMAMFSAc19044蜂蜜(商品)葡萄糖定性色层法
AMAMFSAc19044
蜂蜜(商品)中葡萄糖
1.试剂
苯胺二苯胺生色试剂——将5OOmg二苯胺盐酸盐及0.55ml重蒸苯胺溶解于5Oml丙酮中,加5ml85%磷酸。每天新配制。
2.1.样品的制备
用等体积水稀释样品。向有0.5ml稀释样品的离心管(11×1l水中,用4ml无水乙醇重新沉淀,离心,倾去上清液,沉淀用0.1ml水溶解,将2μl样品点到层析纸的原点,并点上对照点,包括纯蜂蜜和/或蜜露及用上述方法处理的玉米糖浆。
2.2.色层分离
上行或下行层析法均可得到满意结果。以下行法合适的溶剂系统是正丙醇乙酸乙酯水(7+1+2),平衡45min,展开≥40h,让展开剂从齿形滤纸的下缘落下。对较短时间的上行法(约6h),将滤纸卷成一个筒,将滤纸的边缘订住,然后将其放入圆筒形容器,用异戊醇砒啶水(7+7+6)混合溶剂展开。为了提高分辨率,可将滤纸干燥,然后现再重新展开丁次或几次。
用合适的溶剂展开色层滤纸后,取出并干燥。将滤纸浸渍上生色试剂,让丙酮挥发,在8595℃加热约58min,直到经上述方法处理的玉米糖浆控制样的点变成蓝色。含5%商品葡萄糖的蜂蜜或蜜露样品呈现一系列蓝色麦芽糊精斑点;且Rf值很小,会聚在原点附近。蜂蜜及蜜露糊精点为明显的棕色或灰色,而不是蓝色。如果纸加热过度,则蜂蜜糊精斑点和麦芽糊糊斑点都趋近灰色。
3.来源
AOAC官方方法(第17版)
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