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玉足海参低聚肽生产规程

1范围

本文件规定了玉足海参来源低聚肽酶解工艺的设备、原料、工艺以及质量等方面技术要求。

本文件适用于以玉足海参（Holothurialeucospilota）为原料生产分子质量小于2000道尔顿（Da）的低聚肽（短肽）为主要成分的酶解法工艺控制。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB31645胶原蛋白肽

GB/T22729海洋鱼低聚肽粉

NY/T1514绿色食品海参及制品

NY/T391绿色食品产地环境质量标准

GB/T23527.1酶制剂质量要求第1部分：蛋白酶制剂

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1玉足海参

为来源于海参科海参属的一种海参，拉丁名为Holothurialeucospilota(Brandt,1835)。

3.2玉足海参低聚肽

以玉足海参（Holothurialeucospilota）为原料，用酶解法生产的、分子质量小于2000道尔顿（Da）的低聚肽为主要成分的粉末状产品。

3.3酶解工艺

在一定适宜条件下，利用蛋白酶水解蛋白质作用，将蛋白质分子量降低的工艺。

4要求

4.1原料要求

4.1.1海参应符合NY/T1514的规定。国内天然捕捞海参应来源于无污染的海域，养殖海参的产地环境应符合NY/T391的要求；进口海参应具有进口检验检疫证明。

4.1.2所使用蛋白酶等酶制剂应符合GB/T23527.1的规定。

4.1.3所使用纯化水应符合《中华人民共和国药典》（2020年版）的规定。

4.2设备要求

4.2.1酶解反应釜具有混合、加热、保温功能，且具备清洗和消毒条件。

4.2.2干燥设备应根据原料、半成品特性和产品要求选择，包括真空冷冻干燥设备等。

4.2.3离心设备应根据产品要求选择，包括管式离心机、卧式螺旋离心机等。

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5原料

5.1酶解原料

酶解原料主要为经过预处理后，去除内脏的玉足海参体壁。

5.2酶制剂

酶制剂以碱性蛋白酶进行选择，产品规格要求酶活力不低于20万U/g。

6酶解工艺

6.1工艺

玉足海参低聚肽酶解工艺流程见图1。

图1玉足海参低聚肽酶解工艺流程

6.2预处理

采集玉足海参后尽快用热水进行汆烫处理，并分离体壁和内脏，体壁放入-80冰箱保存，备用。

6.3匀浆

将玉足海参体壁粉碎后和纯化水进行混合，按1：10～1：11的固液比（g/mL），得到9%～10%质量浓度的海参匀浆。

6.4酶解

蛋白酶酶解温度应控制在60℃~70℃之间，pH值控制在9.0～10.0，酶解时间为2h～4h。

6.5灭酶

酶解结束后，要对酶解物料进行灭酶处理，灭酶温度≥95℃,灭酶时间10min～15min。

6.6过滤

采用筛网除去酶解物料中固形物。

6.7脱色脱腥

对过滤后酶解液，加入0.2%～0.4%质量分数的粉末活性炭，温度控制在40℃~60℃之间，最宜脱色脱腥时间控制在60min左右。

6.8离心分离

对脱色酶解液采用离心机3500～4000r/min，离心10～15min，除去大部分活性炭后，再使用高速离心机8000r/min，离心15～20min，提取离心后上清液。

6.9浓缩干燥

浓缩后的脱色样品放入真空冷冻干燥机中干燥，最终控制水分≤12%。

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7质量要求

7.1酶解指标及其检测方法7.1.1多肽得率

低聚肽含量按GB/T22729的规定执行，酶解过程多肽得率不得少于40%（以干基计）。

7.1.2低聚肽分子量范围

低聚肽分子量范围按GB31645的规定执行，2000Da分子量肽段分布不得小于90%。

7.2脱色脱腥指标及其检测方法

7.2.1脱色率

脱色率按附录A的规范执行，活性炭的脱色率不得小于30%

7.2.2肽回收率

脱色率按附录A的规范执行，肽回收率不得小于70%。

7.2.3腥味指标

产品不得出现刺鼻性气味。

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附录A

（规范性）

玉足海参低聚肽粉末活性炭脱色脱腥工艺中脱色率/肽回收率的测定方法紫外分光光度法

A.1范围

本部分规定了玉足海参低聚肽粉末活性炭脱色脱腥工艺中脱色率/肽回收率的紫外分光光度计测定方法。

本部分适用于玉足海参低聚肽粉末活性炭脱色脱腥工艺中脱色率/肽回收率的测定。

A.2原理

本法预先采用紫外分光光度计在200-800nm波长范围扫描脱色前酶解物料和脱色后酶解物料，在最大吸收波长460nm处，测得OD值，计算脱色率。