动物细胞的培养条件和培养基.pptVIP

第四节动物细胞的培养

条件和培养基细胞体外培养基本条件:①无菌②营养充足,防止有害物质③氧气随时清除代谢有害物质01良好的生存外环境02及时分种03一、动物细胞的培养条件⒈器材的清洗和消毒⑴器材的清洗浸泡、刷洗、泡酸、冲洗⑵器材的消毒灭菌物理消毒化学消毒水质:电阻值大于18MΩ,去热原。pH:7.2～7.4渗透压:290～300mOsm/kg温度:37±0.5C空气:氧的饱和质60%,氧分压4～0.7kPa二、动物细胞的培养

基的种类和组成分3类:⒈天然培养基⒉合成培养基⒊无血清培养基⒈天然培养基血清、羊水、腹水等,成分复杂、成分不稳定⒉合成培养基DME、MEM、DMEM、HAMF12、RPMI1640氨基酸01维生素02糖类03无机盐04其它成分05添加小牛血清：06添加标题添加标题添加标题添加标题添加标题提供必需脂肪酸和微量元素提供结合蛋白提供贴附因子和伸展因子提供生长因子和激素添加小牛血清的作用无血清培养基提高重复性减少微生物污染供应充足稳定产品易纯化避免血清因素对细胞的毒性减少血清中蛋白对生物测定的干扰添加标题添加标题添加标题添加标题添加标题有利细胞生长的因子和元素贴附因子和伸展因子结合蛋白生长因子和激素无血清培养基加入添加剂第五节动物细胞培养方

法和操作方式动物细胞大规模培养的方法依细胞种类:原代培养、传代培养依培养基:液体培养、固体培养依培养器和方式:静止培养、旋转培养、搅拌培养、微载体培养、中空纤维培养、固定床或流化床培养从生产实际分为:悬浮培养贴壁培养贴壁-悬浮培养DCAB悬浮培养添加标题让细胞自由的悬浮于培养基内添加标题生长繁殖。添加标题贴壁培养添加标题让细胞贴附在某种基质上生长添加标题繁殖的培养方法。添加标题贴壁-悬浮培养添加标题贴壁-悬浮培养微载体培养包埋和微囊培养结团培养二、动物细胞培养的操作

方式01分批式操作03灌流式操作02半连续式操作第六节动物细胞生物反应

器及其检测控制系统动物细胞生物反应器的类型及其基本结构搅拌式生物反应器气升式生物反应器中空纤维式生物反应器透析袋或膜式生物反应器固定床或流化床式生物反应器⒈搅拌式生物反应器logo⒉气升式生物反应器⒊中空纤维式生物反应器平床式中空纤维式生物反应器