微生物的计数.pptxVIP

微生物计数第1页

微生物计数血球计数法平板活菌计数法计繁殖数法只适宜于单细胞状态微生物或丝状微生物产生孢子第2页

血球计数法一、试验原理 血球计数器是一特制厚载玻片，上面刻有一定面积方格，将盖玻片盖上后，由于二者之间存在着距离使之形成一定容积小室。滴入待测样品后，使样品均匀充满小室，在显微镜下计算小室内菌数，换算成单位体积样品中所含菌数。第3页

血球计数法二、血球计数器结构盖玻片 0.1mm1/400mm2 计数室体积25*161mm1mm=(1×1×0.1)mm3=10-4cm3第4页

血球计数板第5页

血球计数法三、血球计数法步骤 1、取待测啤酒酵母菌液，摇匀。并做适当稀释（以每个中格内20左右为宜）。 2、取洁净干燥血球计数器，盖上盖玻片，用滴管吸收少许菌液沿盖玻片边缘滴入一小滴，菌液自行渗透计数室，静止片刻，使菌液均匀充满每小室。第6页

血球计数法示范动作第7页

血球计数法 3、先在低倍镜下找到计数室，注意光线不能太亮，再转到高倍镜下，取5个中格进行计数（每个中格取4个小格）。 计数时注意调整焦距，使不一样焦距菌体都计入，在线上菌，数上不数下，数左不数右。第8页

血球计数法4、菌液浓度计算菌液浓度（菌数/ml)=N×25×104×稀释倍数其中N为每中格内菌数平均值。第9页

平板活菌计数法一、试验原理微生物在固体培养基上形成单菌落，普通认为是由一个细胞繁殖而来，及一个菌落代表一个细胞。计数时，将待测菌样做一系列稀释，再取一定稀释度一定量稀释液接种到平板上，使其均匀分布。经培养后，生长成单菌落，由菌落数推算出单位体积菌液活菌数。第10页

平板活菌计数法 二、平板活菌技术步骤0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml菌悬液10-110-210-310-410-510-6每皿约倒入15ml0.2ml0.2ml0.2ml沙保培养基第11页

平板活菌计数法待凝后倒置于28℃恒温培养48h后计数。（选择菌落数在50～100个左右平板计数）菌液浓度计算菌液浓度（菌数/ml)=菌落数×稀释倍数×5注：只数浓度适当两个平板取平均值第12页

2.3.4.5.注意事项1.过程无菌操作 稀释分离法中熔化后培养基倒平板前温度控制 稀释法中用吸管取试管中液体次序从稀到浓 取样前注意摇匀待测菌液 取样时都要无菌操作。注意取菌液时移液管不要 碰到火焰，以免烧死菌体6.血球计数器要洁净干燥，滴入菌液时在盖玻片与 载玻片间不能有气泡7.血球计数时显微镜光线不宜太亮第13页

思索题１.从两种方法计数得出菌液浓度是否一 致？分析误差产生原因，由此比较一下 二者优缺点及各自适用范围。２.平板活菌计数中，为何选择生长有50～100个菌落平板？第14页