2025高考生物临门一脚 14非选择题基因工程（含答案解析）.docxVIP

猜押14基因工程

猜押考点

3年真题

押题依据

基因工程

2024年江苏卷第23题

2023年江苏卷第22题

2022年江苏卷第24题

从近几年的新课标卷的考查知识点来看，基因工程的流程和应用是高考的必考点，且常考常新，预计2024年高考也不例外，依然会对其进行考查，有可能与新的科研实事结合，综合考查基因工程的流程和应用，比如新冠病毒疫苗的研发，还可能与细胞工程、胚胎工程等综合起来考查

1．（2025·江苏淮安·二模）构建可利用纤维素产乙醇的转基因酿酒酵母菌是解决能源危机的手段之一，思路如下。

Ⅰ.目的基因的选择与获取纤维素降解途径如下

纤维素Ⅰ酶Ⅰ→寡糖???酶Ⅱ→纤维素二糖???酶Ⅲ→葡萄糖

(1)提取总RNA后需在催化下，在引物的端进行DNA链的延伸得到上图中三种酶的基因，转入酿酒酵母中，其表达产物在细胞（填“内”或“外”）发挥作用。

Ⅱ.目的基因的整合方法

同源重组是碱基序列基本相同的DNA区段通过配对、链断裂和再连接而产生片段交换的过程。通过同源重组将外源基因整合到染色体的特定位点可获得遗传稳定的工程菌株，如图1所示。

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注：图1中PCR产物3′端在酶的作用下会多一个“A”碱基

(2)以酶Ⅰ基因为例构建基因表达载体的过程如图1，由图推测，T4DNA聚合酶的作用是，此方法构建基因表达载体的优点是。

(3)图1中空白处“？”应使用限制酶将构建好的基因表达载体进行处理，转入酵母菌进行整合。

Ⅲ.标记基因的选择

URA3是尿嘧啶合成关键酶基因，常被用作标记基因。另外，URA3编码的蛋白可将外源5-氟乳清酸转化为有毒物质，导致细胞死亡。

(4)为得到成功插入酶Ⅰ基因的菌株1，需将酶Ⅰ基因同URA3一起插入URA3缺陷型酿酒酵母基因组rDNA内部，并利用的培养基筛选存活菌株。

(5)在后续插入酶Ⅱ基因时，为继续利用URA3作为筛选标记，需切除菌株1的URA3。为此需改进表达载体，还应向URA3两端引入酿酒酵母基因组中不存在的同源区段loxP（如图2），该序列由反向重复序列和间隔序列组成（如图2），决定其方向的是，该序列以下图方式排列才能通过同源重组达到上述目的。

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(6)此后，需要将菌株1在的培养基上培养，存活菌株即为URA3被成功切除的菌株1。

2．（2025·江苏泰州·二模）RCA是一种核基因（rca）??编码的一种叶绿体蛋白。为研究RCA对光合作用的影响及机理，科研人员构建反义rca基因表达载体（rca基因反向插入表达载体），利用农杆菌转化法导入玉米细胞，成功获得rca基因沉默的转基因品种（如图），①~⑥表示相关过程。请回答下列问题：

(1)参与过程①的酶有，合成的rac基因中（填“存在”或“不存在”）启动子，在引物设计时，需分别在上下游引物的5端添加、的识别序列，以确保反义表达载体的构建。

(2)C4pdk启动子的基本单位是，经过程②替换Ti质粒上原有启动子的目的是。

(3)过程④常用的方法是，经过程⑤后，可利用含的培养基筛选出转染成功的玉米细胞。

(4)培育成功的转基因玉米叶肉细胞中反义基因rac表达会产生反义mRNA，从而使rac基因沉默，其原理可能是，进而抑制翻译过程。

A．反义mRNA与前体正义mRNA结合，??阻止其加工

B．反义mRNA与DNA上相关基因的起始密码子结合

C．反义mRNA与正义mRNA结合，??引发正义mRNA降解

D．反义mRNA与正义mRNA结合，??阻止正义mRNA与核糖体的结合

(5)为研究RCA对光合作用的影响及机理，科研人员将野生型玉米和转基因玉米在适宜的光照条件下进行培养，一段时间后分别测定相关指标，结果如下表（Rubisco是光合作用暗反应中的一种关键酶）。

品种

检测指标

光合速率

叶绿素总量

Rubisco含量

Rubisco活力

野生型玉米

19.88

9.07

1.68

32.68

转基因玉米

9.57

9.09

3.21

14.95

据表分析，RCA对玉米的光合作用具有（从“促进”或“抑制”中选填）作用，其机理主要是通过来影响光合作用强度。

3．（2025·江苏南通·一模）金属硫蛋白（MT3）富含巯基，对金