转录及其调控 (2).pptVIP

关于转录及其调控(2)第1页，共26页，星期日，2025年，2月5日遗传信息由DNA转换到RNA的过程。蛋白质生物合成的第一步:合成mRNA以及非编码RNA（tRNA、rRNA等）转录(transcription)第2页，共26页，星期日，2025年，2月5日多核苷酸链的合成都是以5’→3’的方向.转录特点：（1）对于一个基因组来说，转录只发生在一部分基因，而且每个基因的转录都受到相对独立的控制（2）转录是不对称的.(3）转录时不需要引物，而且RNA链的合成是连续的。第3页，共26页，星期日，2025年，2月5日一、所需因素第一节原核生物转录1.转录模板DNA模板：指导RNA合成的一股DNA链称为模板链（templatestrand），与之相对的另一股链为编码链（codingstrand）.第4页，共26页，星期日，2025年，2月5日模板链,又称反义链编码链，又称有义链第5页，共26页，星期日，2025年，2月5日2.RNA聚合酶（RNApolymerase）RNA聚合酶有以下特点：（1）无需引物的存在能独自起始新RNA链的合成（2）没有校对能力；（3）催化的底物是核糖核苷三磷酸。第6页，共26页，星期日，2025年，2月5日大肠杆菌只有一种RNA聚合酶，负责所有rRNA、mRNA和tRNA的合成。该酶具有全能性，基本上不需要其他蛋白因子的参与，即可独立的进行。功能：（1）识别DNA双链上的启动子（2）通过阅读启动子序列，确定转录方向和模板链（3）解开DNA部分双螺旋，产生约17bp的单链DNA模板（4）选择正确的核糖核苷三磷酸（rNTP）底物并催化形成磷酸二酯键，使合成的RNA链不断延伸。（5）最后当它达到终止子时，识别转录终止信号，停止转录。大肠杆菌RNA聚合酶第7页，共26页，星期日，2025年，2月5日结构：5种亚基组成：两个α亚基、1个β亚基、1个β′亚基和1个δ亚基。转录的起始阶段：δ亚基和核心酶（α2ββ′）组装成全酶共同起作用。δ亚基无催化活性，但它能识别启动子并将封闭的启动子复合物转换成开放状态。一旦转录起始，δ亚基就从全酶上脱离下来。核心酶与模板DNA结合的亲和力弱，特异性差，这有利于它在模板链上移动，促进转录延伸。第8页，共26页，星期日，2025年，2月5日σ因子负责识别启动子的保守序列，不同的σ因子识别不同的启动子。许多细菌能产生多种可取代的σ因子，以识别不同的启动子。σ因子第9页，共26页，星期日，2025年，2月5日一些抗生素，如利链菌素，可以抑制原核生物的RNA聚合酶，使得原核生物的基因无法转录成mRNA，从而达到杀死细菌等原核生物的效果。第10页，共26页，星期日，2025年，2月5日1.转录起始全酶与模板的DNA接触，生成非专一的，不稳定的复合物在模板上移动。2.起始识别：全酶与-35序列结合，产生封闭的酶-启动子二元复合物。3.全酶紧密地结合在-10序列处，DNA模板局部变性，形成开放的启动子二元复合物。（RNA聚合酶与启动子结合后造成约10bp的DNA解链）4.合成短多聚核苷酸（10nt),三元复合物形成。（酶-启动子-NTP）5.σ因子从全酶中解离下来，聚合酶转变为延长构型。酶分子与启动子特异性结合性的结合力下降，延伸阶段开始。二、原核生物转录的起始延伸第11页，共26页，星期日，2025年，2月5日第12页，共26页，星期日，2025年，2月5日转录延长第13页，共26页，星期日，2025年，2月5日第14页，共26页，星期日，2025年，2月5日三、转录的终止终止序列和释放因子终止子：一种位于poly(A)位点下游，长度在数百碱基以内的结构。提供终止信号的序列。原核生物终止子分为两类：不依赖ρ因子而实现终止作用。如强终止子，病毒SV40的终止依赖ρ因子才能实现终止作用。ρ因子---蛋白质辅助因子第15页，共26页，星期日，2025年，2月5日不依赖ρ因子终止作用：在转录终止点之前有一段回文序列，回文序列的两个重复部分之间由几个碱基对的不重复阶段隔开第16页，共26页，星期日，2025年，2月5日依赖于ρ因子终止作用ρ因子是55KDa蛋白，其活性形式为六聚