基因工程与基因组学优品.ppt

基因工程与基因组学;第一节基因工程;一、基因工程概述;二、基因工程的工具酶;EcoRⅠ

属名种名菌株名序号;常见内切酶;（二）DNA连接酶;载体(vector);λ噬菌体载体;载体的基本条件;

获得外源DNA片段（分）

限制性内切酶切割外源DNA片段与载体（切）

外源DNA片段与载体连接（接）

重组DNA分子转入宿主细胞（转）

重组子的筛选与鉴定（筛）

目的基因的确认与分析;（一）外源DNA片段的分离方法;1.构建基因组文库分离法;1996，完成标记密度为0.

基因组计划的第一个环节：构建基因组图谱

结构基因组学（structuralgenomics）

E·coliDNA连接酶

1990，美国国立卫生研究所和能源部投资＄30亿，启动了人类基因组计划，预计15年时间完成人类基因组全部序列的测定

供体生物的基因组DNA切割成许多片段

基因组计划的第一个环节：构建基因组图谱

4、利用基因工程进行不同物种之间的基因传递提供了可能。

将化学合成寡核苷酸的方法与酶促合成DNA的方法结合起来，可以很快地人工合成基因。

三、基因工程的流程及相关技术

常用的载体有细菌质粒、噬菌体、病毒等。

用克隆载体将某种生物的基因组全部遗传信息储存于一个受体菌的群体，即构成了这种生物的基因组文库。

遗传距离通常由基因在四分体时期染色体交换过程中分离的频率厘摩（cM）来表示。

差别显示反转录PCR（DDRT-PCR）

通过用相同的限制性核酸内切酶切割，连接形成一个重组DNA分子

它具有两个基本特征，即可遗传性和可识别性，因此生物的任何有差异表型的基因突变型均可作为遗传标记。

②具有多种限制性酶的切点，用于连接外源DNA片段。;3、利用聚合酶链式反应技术扩增目的基因;4、人工合成基因;;（三）、重组DNA转入宿主细胞;重组DNA;感受态细胞;2.重组DNA转入植物细胞;（四）重组子的筛选与鉴定;1.插入失活筛选法;蓝白斑筛选重组质粒;四、基因工程的发展应用;4.利用基因工程改良动物;

推荐几本参考书：

1、《基因工程原理与方法》，孙树汉编，人民军医出版社

2、《基因工程原理》，吴乃虎编，科学出版社（侧重原理）

3、《现代基因工程技术导??》，陈章良编，科学出版社（侧重应用）

4、《分子克隆》(第三版)，J.Sambrooketal.科学出版社（具体的实验方法，分子生物学研究的圣经）;第二节基因组学;基因组(genome)

泛指一个有生命体、病毒或细胞器的全部遗传物质；在真核生物，基因组是指一套染色体（单倍体）DNA。;基因组学研究的最终目标;;结构基因组学（structuralgenomics）;遗传图（连锁图）

物理图

转录图

序列图;1.遗传图;遗传标记（Geneticmarker）指可识别的等位基因。它具有两个基本特征，即可遗传性和可识别性，因此生物的任何有差异表型的基因突变型均可作为遗传标记。

类型：

形态标记（morphologicalmarker）

细胞学标记(cytologicalmarker)

生化标记(biochemicalmarker)

分子标记(molecularmarker);2.、物理图;3、转录图;4.、序列图;CREDIT:JOESUTLIFF;人类基因组计划;基因组计划的第一个环节：构建基因组图谱

1996，完成标记密度为0.

重组DNA转入真核细胞

2000年6月26日科学家公布人类基因组工作草图，标志着人类在解读自身“生命之书”的路上迈出了重要一步。

基因组计划的第一个环节：构建基因组图谱

若只储存某生物基因组的部分遗传信息，即构成部分基因组文库。

DNA上两点的实际距离，即确定基因在染色体上的实际排列顺序，从而对基因定位。

常用的载体有细菌质粒、噬菌体、病毒等。

细菌人工染色体（BAC）、酵母菌人工染色体（YAC）和人类人工染色体（HAC）

基因组计划的第一个环节：构建基因组图谱

反转录酶（reversetranscriptase）

③载体上的限制酶酶切位点对于任何一种限制酶来说只能有一个。;1999年9月中国获准加入人类基因组计划，负责测定人类基因组全部序列的1%，负责第3号染色体3千万核苷酸的序列测定工作。中国是继美、英、日、德、法之后第6个国际人类基因组计划参与者，也是参与这一计划的唯一发展中国家。;人类基因组计划1%测序中国实验室;2000年6月26日科学家公布人类基因组工作草图，标志着人类在解读自身“生命之书”的路上迈出了重要一步。;HGP对人类基因面貌的新发现;2000年是基因组之年，完成了人类基因组的工作框架图，完成了一系列模式生