微生物的选择培养和计数课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第2节微生物的培养技术及应用01一生物的基本培养技术（第2课时）第1章发酵工程

（三）微生物的纯培养1.相关概念：培养物？纯培养物？纯培养？（P11）2.酵母菌的纯培养的基本步骤？（注意倒平板和接种的具体操作）3.什么是菌落？（P12）4.获得单菌落的方法？（P12）【自主探究】请同学们阅读教材P11-12，完成以下问题：

接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。由单一个体繁殖所获得的微生物群体。过程包括、、、和等步骤。培养物纯培养物纯培养配制培养基灭菌接种分离培养单个细胞微生物群单个菌落连续划线稀释分散生长繁殖微生物的纯培养

酵母菌的纯培养微生物群分散或稀释单个细胞繁殖单菌落(1)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落(2)单菌落：一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。(3)获得单菌落的方法：稀释涂布平板法、平板划线法1.实验原理稀释涂布平板法平板划线法

酵母菌的纯培养2.目的要求(1)学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。(2)学会进行无菌操作。(3)尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落。3.材料用具①酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、蒸馏水②天平，小刀，纱布，烧杯，锥形瓶，棉塞、牛皮纸（或报纸）③皮筋，培养皿，接种环，酒精灯，超净工作台④高压蒸汽灭菌锅，干热灭菌箱和恒温培养箱等

称取去皮的马铃薯200g切成小块加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂。用纱布过滤得到滤液滤液中加入20g葡萄糖，15~20g琼脂。用蒸馏水定容至1000mL4.实验方法步骤：配制培养基

4.实验方法步骤：配制培养基灭菌将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞。包上牛皮纸，并用皮筋勒紧。压力100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15~30min。取5~8套培养皿培养皿叠成一束用几层牛皮纸包紧放入干热灭菌箱内，160~170℃灭菌2h。

培养基冷却到50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板：1拔出锥形瓶的棉塞。3用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿（10～20mL），立即盖上皿盖。4等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。2将瓶口迅速通过火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基不能完全打开，以免杂菌污染培养基防止皿盖上冷凝水落入培养基造成污染。避免培养基的水分过快的挥发。4.实验方法步骤：配制培养基灭菌倒平板

4.实验方法步骤：配制培养基灭菌倒平板

如果需要调节培养基的pH，应该在定容完成后，灭菌之前进行操作。1.培养基pH要适宜，调pH是在灭菌前还是灭菌后？问题思考与分析：2.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。3.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？最好不要用这个平板培养微生物。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。计算称量溶化定容调PH灭菌倒平板

琼脂是一种多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板时，高于50℃则会烫手，若低于50℃不及时操作，琼脂会凝固。7.为什么倒平板时，将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能完全打开？防止杂菌污染培养基4.培养基灭菌后为什么要冷却到50℃左右时开始倒平板？6.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。问题思考与分析：8.为什么倒平板和接种整个过程要在酒精灯火焰旁进行？酒精灯火焰附近是无菌区域，避免周围环境中的杂菌污染

9.倒平板时为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。问题思考与分析：10.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。11.在灭菌前，用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞；在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。

4.实验方法步骤：接种和分离酵母菌——平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落。连续划线法分区划线法

034.实验方法步骤：接种