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第四章食品毒理学实训;实训一实验动物的饲养管理
一、预备知识:实验动物房的环境要求
(一)实验动物房的环境因素
实验动物房的环境因素分为:①物理因素。②化学因素。③生物因素。④人为因素。
实验动物环境总体上可分为三类:①普通环境。②屏障环境。③隔离环境。;(二)实验动物房的环境指标
环境条件不仅影响实验动物的质量,而且还直接影响动物实验的科学性、动物反应的敏感性和实验结果的可重复性,所以必须严格控制实验动物的环境条件。
封闭式动物房要求将各种影响因素控制如下:温度20~26℃;湿度50%~70%;噪声<60dB。并且还应注意防止人耳听不到的20000~50000Hz超声波的影响;换气8~15次/h;气流10~25㎝/s,定时照明l0~14h/d。
实验动物房的房间不宜过大,每间以20㎡为好。10只小鼠至少占1~1.5m3,l0只大鼠2~3m3,每只兔1m3。动物房的其他环境指标如表4-1所示。;;(三)实验动物房的消毒措施
为了保障工作人员的健康和预防实验动物疾病,动物房内应制定定期的清洁卫生和消毒制度,保持室内清洁。每天上班后,立即检查动物的一般状况,发现病鼠、死鼠应查明原因,及时处理并登记。消毒包括定期消毒和临时消毒。定期消毒包括每日(1~2次)、周(大扫除1次)、月、季度等对动物房、笼具、垫料、器械以及工作人员的手、衣物进行消毒;临时消毒是指为了扑灭、控制或预防疾病的传播所采用的临时措施。
动物房消毒方法可分为:①机械消毒法。这是常规使用的方法。②物理消毒法。③化学消毒法。;二、操作训练:实验动物的饲养管理
(一)实训目的
(二)仪器和材料
(三)操作方法
1.大、小鼠的日常饲养管理
2.兔的日常饲养管理
3.实验动物健康的观察和评价
(1)动物的外表与行为观察
(2)个体检查
(3)采食和饮水观察;(四)实训结果
1.计算动物一昼夜之内的摄食量和饮水量。
2.对动物进行观察检查后,认真填写以下记录表,作出相应评价。;实训二实验动物的分组、标记和染毒技术
一、???备知识:实验动物染毒途径
毒理学试验中染毒途径的选择,应尽可能模拟人在接触该受试物的方式。最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。不同染毒途径,毒物的吸收速率不同,一般是:静脉注射>吸入>肌肉注射>腹腔注射>皮下注射>经口>皮内注射>其他途径(如经皮等)。;(一)经口(胃肠道)染毒
经口染毒指经口摄入到达胃或用器械直接送入胃的过程。常用灌胃、喂饲和吞咽胶囊等方式。
(二)经呼吸道染毒
气态和易挥发的液态化学物及气溶胶均有可经呼吸道染毒。经呼吸道染毒(inhalationexposure)常用于研究气体、蒸汽、粉尘、烟、雾等环境污染物的毒性,这些外源化学物可由人工染毒,也可由动物自行吸入。前者是将外源化学物气管内注入,后者有静式吸入和动式吸入两种染毒方法。;(三)经皮肤染毒
染毒过程:脱毛→涂抹受试物→覆盖→固定。
(1)经皮肤吸收毒性。
(2)皮肤刺激毒性。
(四)注射染毒
注射用药品应以注射途径染毒,对非啮齿类可模拟临床用药途径,如狗可用后肢隐静脉注射,而啮齿类的尾静脉和肌肉注射难以多次染毒,必要时可改为皮下注射。注射染毒,应调整受试物的pH及渗透压,pH应5~8,最好是等渗溶液,动物对高渗的耐受力比低渗强。静脉注射应控制速度,大鼠尾静脉注射最好控制在10秒以上。;注射染毒主要用于绝对毒性研究、比较毒性研究、毒物静脉注射代谢动力学研究和中毒的急救药物筛选。常根据试验要求选择。实验动物不同注射途径的注射量见表4-3。;二、操作训练:实验动物的分组、标记和染毒技术
(一)实训目的
(二)仪器和材料
(三)操作方法和步骤
1.健康动物的选择和性别鉴定;2.实验动物的抓取方法;第四章食品毒理学实训;第四章食品毒理学实训;3.实验动物称重、分组、编号、标记方法
(1)称重。大、小鼠秤的感应量需在0.1g以下。根据实验的不同要求,选择一定数量的大、小鼠,体重要求在同一组内、同性别动物体重差异应小于平均体重的10%,不同组间同性别动物体重均值应小于5%。
(2)随机数字分组法。
将实验用30只雄性动物平均分成A,B,C,D,E,F六组,每组5只动物。将已编好号的动物依号码用随机数目表(见附表Ⅰ)分配。如选随机数目表第二行,从第一个数目开始,依次抄下30个数目(依横行、纵行、甚至斜行抄录均可)。将各数目一律以组数除
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