药品质量标准分析方法验证.ppt

线性线性系指在设计的测定范围内，检测结果与试样中被测物的浓度直接呈正比关系的程度。线性是定量测定的基础，涉及定量测定的项目，如杂质定量测定和含量测定均需验证线性。验证方法应在规定的测定范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列供试样品的方法进行测定，至少制备5个浓度的供试样品，每个浓度各一份，每份供试样品检测3次，以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第30页，共75页，星期日，2025年，2月5日线性通常做法（1）如上：取不同浓度的标准品溶液（不少于5个浓度），分别进样相同体积，然后计算进样量与峰面积之间的线性关系；（2）取同一浓度的标准品溶液，分别进样不同体积（不少于5个体积），然后计算进样量与峰面积之间的线性关系。个人认为：第（2）种更科学，包括样品量的变化，进样体积的变化，但从药审角度来看，更青睐于第一法，因为第一法是单因子考察。一般情况：直线40%设为常量，最高量为常量的2.5倍，最低量为常的1/4倍，点数一般5~7个。如：分别精密量取标准品贮备液1ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml置10ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，混匀…其中4ml配制的浓度为常量浓度第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第31页，共75页，星期日，2025年，2月5日线性通常做法若为新药，常量浓度如何确定？可通过3根不同填料色谱柱，确定尖峰（非平头）最大浓度，同时需综合考虑样品制备过程。常量为最大浓度的40%最小量为确定常量的1/4进样量常量：20μl故一般体积进样：则为5μl、10μl、20μl、30μl、40μl、50μl常量：10μl故一般体积进样：则为2.5μl、5μl、10μl、15μl、20μl、25μl第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第32页，共75页，星期日，2025年，2月5日线性线性范围要足够宽，含量测测至少80%~120%，但药材有时特别低，所以药材要保证最低点在线性范围内。不同分析方法的线性验证和准确度验证需涵盖的最低浓度范围第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第33页，共75页，星期日，2025年，2月5日线性数据要求应列出回归方程、相关系数和线性图。可接受标准：r值在0.9995以上，Y轴截距应在100％响应值的2％以内。第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第34页，共75页，星期日，2025年，2月5日精密度精密度系指在规定的测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。精密度与准确度不同，下图形象地描绘了精密度和准确度之间的差别。精密度体现了多次重复测定同一被分析物时各测定值之间的接近程度，但它不能表达与已建立的真实值或参考值之间的符合程度，后者由准确度来测定。通过一系列的测定值，可以得到良好的精密度，但是由于所用分析方法存在的偏差，所得的平均值不一定与真实值或参考值相符，在这种状况下，需要修改方法以消除偏差。第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第35页，共75页，星期日，2025年，2月5日精密度精密度与准确度关系图第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第36页，共75页，星期日，2025年，2月5日精密度验证方法精密度可从重复性、中间精密度、重现性三个层次考察。重复性：在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度。重复性需考察以下两方面：仪器精密度和方法精密度仪器精密度：考察仪器（包括进样器）、色谱柱、流动相、样品与色谱条件之间是否符合要求。考察方法：取同一标准品溶液，连续进样6针，测得峰面积或峰高，计算RSD%值。可接受标准：RSD%≤2.0n≥6第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第37页，共75页，星期日，2025年，2月5日精密度方法精密度：在考察仪器精密度的基础上，考察所拟定的方法是否符合精密度要求，包括称量，制备及测定过程。考察方法：取同一样品，在规定范围内，至少用9个测定结果进行评价。例如：设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液或将相当于100%浓度水平的供试品溶液，用至少测定6次的结果进行评价。可接受标准：RSD%≤2.0n≥6第一部分：药品质量标准分析方法验证方法验证第38页，共75页，星期日，2025年，2月5日精密度中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员、用不同设备测定结果之间的精密度。验证方法：