食品安全食品中氨基酸的测定.pptx

2016-12-23发布

食品安全国家标准食品中氨基酸的测定

2017-06-23实施

中华人民共和国国家标准

GB5009.124—2016

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局

发布

GB5009.124—2016

前言

本标准代替GB/T5009.124—2003《食品中氨基酸的测定》。

本标准与GB/T5009.124—2003相比,主要变化如下:

—标准名称修改为“食品安全国家标准食品中氨基酸的测定”;

—扩大了适用范围;

—增加了方法的检出限和定量限;

—修改了结果计算的公式。

Ⅰ

1范围

本标准规定了用氨基酸分析仪(茚三酮柱后衍生离子交换色谱仪)测定食品中氨基酸的方法。

本标准适用于食品中酸水解氨基酸的测定,包括天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸共16种氨基酸。

2原理

食品中的蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸,经离子交换柱分离后,与茚三酮溶液产生颜色反应,再通过可见光分光光度检测器测定氨基酸含量。

3试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682中规定的一级水。

3.1试剂

3.1.1盐酸(HCl):浓度≥36%,优级纯。

3.1.2苯酚(C6H5OH)。

3.1.3氮气:纯度99.9%。

3.1.4柠檬酸钠(Na3C6H5O7·2H2O):优级纯。

3.1.5氢氧化钠(NaOH):优级纯。

3.2试剂配制

3.2.1盐酸溶液(6mol/L):取500mL盐酸加水稀释至1000mL,混匀。

3.2.2冷冻剂:市售食盐与冰块按质量1∶3混合。

3.2.3氢氧化钠溶液(500g/L):称取50g氢氧化钠,溶于50mL水中,冷却至室温后,用水稀释至100mL,混匀。

3.2.4柠檬酸钠缓冲溶液[c(Na+)=0.2mol/L]:称取19.6g柠檬酸钠加入500mL水溶解,加入16.5mL盐酸,用水稀释至1000mL,混匀,用6mol/L盐酸溶液或500g/L氢氧化钠溶液调节pH至2.2。

3.2.5不同pH和离子强度的洗脱用缓冲溶液:参照仪器说明书配制或购买。

3.2.6茚三酮溶液:参照仪器说明书配制或购买。

3.3标准品

3.3.1混合氨基酸标准溶液:经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液。

食品安全国家标准

食品中氨基酸的测定

GB5009.124—2016

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GB5009.124—2016

3.3.216种单个氨基酸标准品:固体,纯度≥98%。

3.4标准溶液配制

3.4.1混合氨基酸标准储备液(1μmol/mL):分别准确称取单个氨基酸标准品(精确至0.00001g)于同一50mL烧杯中,用8.3mL6mol/L盐酸溶液溶解,精确转移至250mL容量瓶中,用水稀释定容至刻度,混匀(各氨基酸标准品称量质量参考值见表1)。

3.4.2混合氨基酸标准工作液(100nmol/mL):准确吸取混合氨基酸标准储备液1.0mL于10mL容量瓶中,加pH2.2柠檬酸钠缓冲溶液定容至刻度,混匀,为标准上机液。

4仪器和设备

4.1实验室用组织粉碎机或研磨机。

4.2匀浆机。

4.3分析天平:感量分别为0.0001g和0.00001g。

4.4水解管:耐压螺盖玻璃试管或安瓿瓶,体积为20mL~30mL。

4.5真空泵:排气量≥40L/min。

4.6酒精喷灯。

4.7电热鼓风恒温箱或水解炉。

4.8试管浓缩仪或平行蒸发仪(附带配套15mL~25mL试管)。

4.9氨基酸分析仪:茚三酮柱后衍生离子交换色谱仪。

5分析步骤

5.1试样制备

固体或半固体试样使用组织粉碎机或研磨机粉碎,液体试样用匀浆机打成匀浆密封冷冻保存,分析用时将其解冻后使用。

5.2试样