DB13_T1384.1-2011_饲料中四种β-内酰胺类药物的测定_河北省.docxVIP

ICS65.120

DB13

B46

河北省地方标准

DB13/T1384.1—2011

饲料中4种β－内酰胺类药物的测定

Determinationoffourkindsofβ-lactamsinfeed

河北省质量技术监督局发布

DB13/T1384.1—2011

前言

本标准按照GB/T1.1－2009给出的规则起草。

本标准由河北省质量技术监督局提出。

本标准起草单位：河北大学、河北省食品质量监督检验研究院、河北医科大学、北京出入境检验检

疫局技术中心、石家庄市疾病预防控制中心、河北省饲料产品质量监督检验站。

本标准主要起草人：张岩、李挥、吕品、丛斌、卢晓宇、张敬轩、沈磊、米振杰、贾茜、张宏、杨

立学、李志平、高振同、武英利。

I

DB13/T1384.1—2011

饲料中4种β－内酰胺类药物的测定

1

范围

本标准规定了饲料中青霉素G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林4种β-内酰胺类药物的液相色谱-

串联质谱测定方法。

本标准适用于饲料中青霉素G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林的测定。

本标准的方法检出限：青霉素G、青霉素V为1.0μg/kg；氨苄西林、阿莫西林为2.0μg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

试样中的4种β-内酰胺类药物残留，用OasisHLB或相当的固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱

OasisHLB固相萃取柱或相当者：500mg，6mL。使用前分别用5mL甲醇和10mL水预处理，

4.7青霉素G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林标准储备溶液：准确称取适量的每种标准物质，分别

用乙腈配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。储备液贮存在-18℃冰柜中。

4.8青霉素G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林标准工作溶液：根据需要吸取适量青霉素G、青霉素

V、氨苄西林、阿莫西林标准储备溶液，用空白样品稀释成适当浓度的基质混合标准工作溶液。

1

DB13/T1384.1—2011

5.3漩涡混匀器。

5.4固相萃取真空装置。

5.5微量进样器：25μL，100μL。

5.6刻度样品管：5mL，精度为0.1mL。

5.7真空泵：真空度应达到80kPa。

5.8

pH计：测量精度0.01。

5.9氮吹仪。

5.10高速离心机。

6测定步骤

6.1试样溶液的制备

称取5g试样（精确到0.01g）置于100mL离心管中，加人45mL去离子水，于漩涡混匀器上快

速混合5min，以5000r/min离心10min，将上清液移至OasisHLB柱中，以小于或等于3mL/min的

流速通过固相萃取柱后，用5mL水洗柱，弃去全部流出液。在65kPa的负压下，减压抽干20min，最

后用3mL甲醇洗脱，收集洗脱液于刻度样品管中，于40℃水浴中用氮吹仪吹干，用乙腈定容至1mL，

摇匀后，供液相色谱-串联质谱仪测定。

6.2测定

6.2.1液相色谱条件

表1液相色谱梯度洗脱条件

水（含0.4％乙酸）/（％）

离子源：电喷雾离子源（ESI）。

定性离子对、定量离子对，见表2。

其余质谱条件见附录A。

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DB13/T1384.1—2011

表2定性离子对与定量离子对

青霉素G

青霉素V

氨苄西林

阿莫西林

定性离子对

335/160

335/176

351/160

351/192

350/192

350/160

366/114

366/208

（m/z）

定量离子对

335/160

351/160

350/160

366/208

（m/z）

6.2.3液相色谱－串联质谱测定

6.2.3.1定性测定

在相同试验条件下，样品中待测物质与基质标准溶液中对应物质的保留时间偏差在±2.5％之内；

样品色谱图中各定性离子对相对丰度与浓度接近的基质标准溶液的色谱图中离子相对丰度相比，若偏差

不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在该残留。

表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度

＞50

±20

＞20～50

±25

＞10～20

±30

≤10

±50

允许的最大偏差

在仪器最佳工作条件下，用青霉素G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林标准储备溶液配成的基质混

合标