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细胞学诊断检材的制备技术

一、细胞涂片、组织印片和压片的制备

（一）涂片质量的基本要求

1.将检材涂布于载玻片的右（或左）2/3处，另1/3部位粘贴标签。

2.单向涂布检材，避免细胞变形。

3.均匀涂布检材，涂片厚薄适当。

4.红细胞过多的涂片，可酌情进行溶解红细胞处理。

（二）涂片方法

1.涂抹法：用棉签或针头将标本单向、均匀地涂抹于载玻片上。

2.拉片法：将一滴检材置于一张载玻片上，再用另一张载玻片叠加其

上并予轻压，再将该两张载玻片朝反向拉动，从而获得两张涂片。

3.推片法：将一滴检液置于载玻片的右端，再用另一张窄边光滑的载

玻片作为推片，并以与滴液载玻片成40°夹角、自右向左匀力推动检液，形成涂片。

（三）痰涂片的制作

1.送检的痰液应是由肺内咳出，最好是清晨空腹时自肺内深咳出的痰液。

2.核查无误的收验痰液，应立即制作涂片（通常为2～3张）。

3.用细签或无钩镊子挑取痰液置于载玻片上，并左右往复薄涂，随即投入固定液中。

4.痰液中呈现下列性状的成分可能含有癌细胞，应注意挑取制作涂片：①血丝；②灰白色痰丝（形如白色细线，微细螺旋状，牵引时可伸长）;③透明痰液（可拉成较长细丝）。[及时在细胞学检查申请单上记录痰液性状]

5.检查痰液中的肿瘤细胞，一般应连续送检3次。

（四）黏膜、皮肤表面刮取（刷取、拉取）物和分泌物的涂片的制作

1.阴道排出物、子宫颈刮取物涂片：通常由妇产科医师将已制作、固定后的涂片送交病理科检查。[注意由子宫颈外口上皮移行带刮取细胞涂片]

2.支气管镜、胃镜等内腔镜的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由内腔镜医师制作、固定后送交病理科检查。

3.食管、胃拉网涂片：由食管拉出的套网气囊适量放气后，将气囊套网在载玻片滚动涂片，尤应将套囊上血丝、灰白色物制作涂片；涂片通常由有关临床医师将已制作、固定后的涂片送交病理科检查。套网中的小块组织可用来制作石蜡包埋切片。

4.眼、耳、鼻、咽、口腔、皮肤等处病变（溃疡性病变等）的分泌物涂片。

（五）液体涂片的制作

液体标本（检材）包括乳头溢液、胸腔积液、腹水、尿液、胃液、脑脊液、穿

刺液、冲洗液、灌注液等。除乳头溢液外，其他液体检材一般均应先行离心（2000r/min，10～20min）后，取其沉淀物制作涂片；液体检材也可用细胞涂片离心机（cytospin）直接制作细胞涂片。制作好的涂片应立即固定和染色。[及时在细胞学检查申请单上记录液体标本的性状和数量]

液体标本的离心沉淀物较多时，将制作涂片后剩余的沉淀物固定于4%中性甲醛中1h，然后用擦镜纸或绸布将其包裹，制作石蜡包埋切片。

1.乳头溢液：直接滴于载玻片上制作涂片。

（1）患者乳腺触及肿物时：用手指自肿物远方沿乳腺导管引流方向轻力按

模挤压，获取溢液，宜取中段溢液和血性溢液涂片。

（2）患者乳腺未触及肿物时：可自乳晕周围向乳腺外周轻力按摩挤压，获取溢液。

2.胸水和腹水

（1）由患者体内抽取的胸腔积液或腹水应尽快送交病理科验收，检液量以200～500ml为宜。因故（例如远途）延时送达时，需在标本中加入40%的甲醛（加入量为送检胸腔积液、腹水量的1/5），或加入等量的50%乙醇－生理盐水。

（2）胸腔积液、腹水的离心：采取容器底部的液体10ml（包括可能存在的沉淀物），移入离心管内进行离心。

（3）离心后，倾去全部上清液，将离心管底部含有沉淀物的液体摇匀并用吸管吸出适量，滴注于载玻片上，制作涂片。

3.尿液

（1）制作方法同胞、腹水。

（2）尿液含有胶状物时，应先将其除去。清除方法：用0.5ml/L氢氧化钠调节尿液Ph至6.0；离心后，倾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5～10ml/L（固定细胞），静置5min后加入蒸馏水并轻摇（溶去胶状物）；再次离心后，取沉淀物制作涂片。检查尿液中的肿瘤细胞，一般应连续送检3次。

4.胃液、胃冲洗液：制作方法同胞、腹水。

5.脑脊液

（1）制作方法同胞、腹水。

（2）脑脊液内细胞一般较少，可用微孔滤膜过滤法、沉淀法或纤维捕捉法收集细胞，制作涂片。

6.冲洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作：参见上述的胸腔积液、腹水项。

二、肿物细针穿刺物涂片的制备

（一）实施细则针穿刺术前的准备工作

1.实施细则针穿刺术的病理医师应先了解患者临床情况，向患者和/或患者授权人说明实施穿刺术的意义、局限性和其他相关问题等，取得患者和/或患方的知情和理解，并签署由各医院制订的《申请实施细针穿刺术细胞病理学诊断患方知情同意书》。

2.合格的手术操作环境。

3.必备的适用手术器械和其他相关设施。

（二）肿物穿刺术的操作要点：

1.确认肿物部位并估计其大小、与皮表距离和质地（实/囊性、硬度等），以指导穿刺的方向、深度和用力程度。

2.必须严格实行无菌操作。

3.根据肿物大小及其血供情况选择适用型号的穿刺用针头