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重组DNA技术的基本工具第三章第一节
本节聚焦重组DNA技术所需的三种基本工具是什么?他们的作用分别是什么?01基因工程载体需要具备什么条件?02
从社会中来什么是基因工程?DNA双螺旋的直径仅2nm,科学家如何操作编辑基因?木瓜是一种非常健康的热带水果,它富含17种以上氨基酸及钙、铁等,还含有木瓜蛋白酶、番木瓜碱等营养物质,具有抗氧化功能,可以减少炎症,抗击疾病,并帮助我们保持机体年轻功能。转基因番木瓜的获得需要依赖什么工程技术?基因工程和植物组织培养技术
基因工程基因工程:是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫重组DNA技术。原理:操作对象:操作水平:结果:意义:基因重组基因分子水平赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。定向改造生物性状;克服远缘杂交不亲和障碍。
基因工程理论基础为什么不同生物的DNA分子能拼接起来?为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?(1)DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。(2)双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。(1)基因是控制生物性状的独立遗传单位。(2)遗传信息的传递都遵循中心法则。(3)生物界共用一套遗传密码。基因在空间上转移并成功表达接剪运
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”来源:作用:结果:主要是从原核生物中分离纯化来的。能够①识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,②并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。限制酶是一类酶识别序列的中轴线两条链分别切开平末端识别序列中轴线两侧两条链分别切开黏性末端
回文序列大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成;也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。都可以找到一条中(心)轴线;中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的,称为回文序列。正向读与另一条链反向读的碱基顺序完全一致。特点1:特点2:EcoRⅠ:SpeⅠ:EcoRV:HindⅠII:
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”EcoRⅠ属名Escherichia首字母种名coli前两个字母R型菌株从中分离的第一个限制酶限制酶名字的由来推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么?主要起到切割外源DNA使之失效,从而达到保护自身的目的。为什么限制酶不切割原核生物自身的DNA分子?①含某种限制酶的细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列;②或者甲基化酶将甲基转移到了限制酶所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。酶的专一性
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”限制酶能切开RNA分子的磷酸二酯键吗?结合右图,推断限制酶切一次可断开个磷酸二酯键,产生个游离的磷酸基团,产生个黏性末端,消耗分子水。要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性(平)末端?不能,限制酶只能识别并切开特定序列的双链DNA分子两两两两要想获得某个特定性状的目的基因,要切2个切口,产生4个黏性(平)末端。
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”2个不同来源的DNA片段A和B,A片段用限制酶SpeⅠ进行切割,B片段分别用限制酶HindⅢ、XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。写出限制酶SpeⅠ、HindⅢ、XbaⅠ和XhoⅠ切割形成的黏性末端。SpeⅠ:HindⅢ:XbaⅠ:XhoⅠ:
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”2个不同来源的DNA片段A和B,A片段用限制酶SpeⅠ进行切割,B片段分别用限制酶HindⅢ、XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。同种限制酶切割产生的黏性末端是否相同?不同限制酶切割产生的黏性末端是否一定不同?同种限制酶产生的黏性末端相同。不同的限制酶可能会形成相同的黏性末端。(同尾酶)
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”2个不同来源的DNA片段A和B,A片段用限制酶SpeⅠ进行切割,B片段分别用限制酶HindⅢ、XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。哪种限制酶切割B片段产生的DNA片段能与限制酶SpeⅠ切割A片段产生的DNA片段相连接?为什么?连接完成后,该重组DNA分子的新连接处能否再被所用的限制酶识别?为什么?XbaⅠ。因为XbaⅠ与SpeⅠ切割产生了相同的黏性末端。不能。因为所用的两种限制酶均不能识别该重组DNA分子的新连接处的脱氧核苷酸序列。
DNA连接酶——“分子缝合针”作用:分类:将两个DNA片段连接起来,恢复
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