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第3节动物体细胞核移植技术和克隆动物【本节聚焦】1.什么是动物细胞核移植技术?2.动物体细胞核移植的基本过程是什么?3.体细胞核移植技术的应用前景有哪些?4.怎样理性看待体细胞核移植技术存在的问题?第二章细胞工程
“(悟空)拔一把毫毛,丢在口中嚼碎,望空喷去,叫一声‘变!’,即变作三二百个小猴,周围攒簇(cù)。”这是《西游记》中的一段描述,展示了中华先贤的想象力。毫毛来自体细胞,我们能用体细胞“变”出一群猴吗?2017年,中国的科学家将这一幕变成了现实,他们利用体细胞核移植技术成功克隆出两只猕猴“中中”和“华华”。核移植相当于孙悟空的“魔法”问题探讨P52-1
一、动物细胞核移植技术1.概念:将动物一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。卵母细胞动物细胞取核去核移入重组细胞发育新胚胎发育克隆动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物2.原理:动物细胞核的全能性3.种类:胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度,表现全能性;细胞分化程度,表现全能性。低相对容易高十分困难这说明什么?整个细胞随分化程度的提高,分化潜能逐渐减弱,全能性受到限制。P52-2P52-3
一、动物细胞核移植技术思考1:为什么体细胞克隆猴的诞生能够轰动世界?有什么困难吗?原因:①供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低;②对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。我国科学家经过多年努力,攻克了这些障碍,终于成功获得了世界上首例体细胞克隆猴。思考2:为什么要进行克隆猴的研究?研发新药时,进行药物的筛选。克隆鼠、兔等不能吗?鼠和兔等哺乳动物与人类的亲缘关系比较远,用它们筛选出来的药物对人类的效果不好甚至没有作用。自然界的猴?①自然界的猴繁殖慢;②自然界的猴基因型不同,会干扰实验结果;③有时用转基因猴进行药物筛选效果更好P52-3
1.下列有关核移植的说法,错误的是()A.通过核移植得到的细胞称为重构胚B.哺乳动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植C.核移植得到克隆动物的过程属于无性生殖D.动物体细胞表现全能性的难易程度与其分化程度无关趁热打铁D
3.过程:采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)2)为何选MⅡ期的卵母细胞?原因:①其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质;②卵母细胞体积大,易操作;③卵母细胞营养物质丰富。去核:显微操作取体细胞去核的卵母细胞供体细胞1)何为供体、受体?供体:提供细胞核的个体受体:MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)卵母细胞一.动物细胞核移植技术P53图2-18此时卵母细胞已发育成熟,细胞质中具有激活重构胚以及早期胚胎发育的必需因子。
3.过程:3)P54-思考·讨论1.在将体细胞的核移植到卵母细胞之前,为什么必须先对卵母细胞进行去核操作?原因:保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。4)“核”的实质是什么?(P52页)一.动物细胞核移植技术P53图2-18采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)去核:显微操作取体细胞去核的卵母细胞供体细胞
3.过程:采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期去核:显微操作去核的卵母细胞5)“去核”的方法是什么?目前普遍使用的去核方法是显微操作去核法。一.动物细胞核移植技术P53图2-18显微操作去核第一极体次级卵母细胞去核时,由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管一般一并吸出第一极体也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。P54相关信息P53图2-18优点:这些方法在没有刺破透明带或卵母细胞质膜,使DNA变性失活,达到去核的目的。对卵母细胞伤害小。
去核的卵母细胞供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞的透明带电融合法激活方法:①物理方法;②化学方法重构胚早期胚胎3.过程:一.动物细胞核移植技术选择10代以内6)P54-思考·讨论2.供体一般选用传代10代以内的细胞,为什么?当传代至10-50代左右时,部分细胞核型可能会老化或DNA损伤,存在失去分裂能力或癌变风险,而10代以内的细胞一般保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。P53图2-18
去核的卵母细胞供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞的透明带7)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。电融合法8)激活重构胚目的是?激活方法:
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