DB22_T2140-2014_大豆抗菌核病鉴定技术规程_吉林省.docxVIP

ICS65.020

DB22

B16

吉林省地方标准

DB22/T2140—2014

大豆抗菌核病鉴定技术规程

Ruleforevaluationinsoybeanresistancetosclerotiniastemrot

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T2140—2014

前

言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由吉林省农业委员会提出并归口。

本标准起草单位：吉林省农业科学院。

本标准主要起草人:王义生、张伟、徐文静、李启云、张金花、杨向东。

I

DB22/T2140—2014

大豆抗菌核病鉴定技术规程

1范围

本标准规定了室内离体叶柄接种法对大豆菌核病抗性鉴定的试验条件、病原物接种体的制备、试验

设计、鉴定方法、调查及抗性评价等技术方法和评价标准。

本标准适用于栽培大豆对菌核病的抗性鉴定。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

大豆菌核病sclerotiniastemrotofsoybean

由核盘菌[Sclerotiniasclerotiorum（Lib．）deBary]侵染大豆引起的真菌性病害。

2.2

PDA培养基potatodextroseagarmedium

按一定比例人工配置的马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基，可以使病原体在其上生长的基质，简称PDA

培养基。

evaluationofresistance

1

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d)

灭菌的不锈钢方盘（30cm×40cm×3cm）

4病原物接种体制备

4.1病原菌来源

大豆核盘菌由吉林省农业科学院植物保护研究所大豆病害研究室提供（经专家鉴定），具体形态症

状见附录A。

4.2病原菌的繁殖

选用PDA培养基扩大繁殖。将核盘菌菌丝于PDA平板上培养，25℃条件下培养4d，待菌丝长满平皿

后备用。

4.3病原菌的保存

收集PDA培养基上的菌核于灭菌的试管中封严，置于4℃冰箱保存。

5试验设计

5.1选择前茬不是大豆的田地作为鉴定圃，将参鉴品种随机排列，每个品种种植行长5m，1行区，

10cm等距点播。每15份～20份材料设已知抗、感病性稳定的对照品种1组。

5.2抗性鉴定采用的对照材料为：吉育35（高抗）；吉农21（抗）；吉育24（中抗）；吉育89（感）；

吉育47（高感）。

6鉴定方法

4片复叶后，从顶部采集完全展开的第二个复叶的叶柄，采集时，尽量保护叶柄不受意外机械伤害，

做好标记，每个品种（包括对照品种）至少采集10个叶柄,采回后立即进行菌核病菌碟接种。

将长满培养基的病原菌（培养4d左右的大豆菌核病病原菌PDA培养基取出），用打孔器在菌丝外围

5㎜处，用打孔器制成直径在5㎜菌碟，备用。

将消毒后的纱布2层铺于消毒后的方盘中，用无菌水将纱布刚好浸没，将采集的大豆叶柄先用无菌

水冲洗2次～3次，2端用无菌脱脂棉包扎，整齐摆放于纱布上，叶柄间的距离在1cm以上，叶柄凹陷

处朝上，用镊子夹取备用的菌碟将菌丝面接种到大豆叶柄中间凹陷处，每个方盘应摆放每个标准对照品

种叶柄至少3个，方盘摆满后，用保湿膜盖上方盘，置于温度24℃～25℃，湿度90%的可控温湿度培

养箱中。

2

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在叶柄菌碟接菌后，24h、48h、72h、96h、120h、144h定期用游标卡尺测量病斑长度。

7.2数据统计与分析

根据调查数据，先对每个试验品种调查点调查数据进行数据统计，去除离均差最大的数值，并计算

每个调查点的平均数据，以病斑长度为因变量，接菌时间为自变量按式（1）建立线性回归方程。

y=b0+b1x.......................................(1)

式中：

y——因变量病斑长度；

x——自变量接菌时间；

b0——常数；

b1——回归系数。

并以此回归方程计算在接菌后90h时病斑长度L90h，根据标准对照品种的病斑长度，对试验品种按

下边不等式划分6个等级。见表1

表1大豆抗菌核病级别划分

发病级别

划分标准

L90h=0

鉴定结果

免疫

高抗

抗

0

1

3

5

7

9

L90h＜[L(HR)90+L(R)90

]/2

[L(HR)90+L(R)90]/2≤L90h＜[L(R)90+L(MR)90

[L(R)90+L(MR)90]/2≤L90h＜[L(MR)90+L(S)90]/2

[L(MR)90+L(S)90]/2≤L90h＜[L(S)90+L(HS)90

[