菌与噬菌体的防治.pptVIP

第四章发酵工艺过程控制;

纯种发酵〔单菌或混菌〕；菌种以外的微生物都被视为杂菌。

所谓染菌，是指在发酵培养基中侵入了有碍生产的其它微生物。

几乎所有的发酵工业都有可能遭遇杂菌或噬菌体的污染。染菌的结果，轻者影响产量或质量，重者可能导致倒罐，甚至停产，造成原料、人力和设备动力的浪费。;一、杂菌污染的原因与防治;根据谷氨酸发酵情况分析，染菌原因以

设备问题〔设备渗漏、管道不严、设备死角〕和空气问题〔过滤器不严、过滤器失效、过滤器受潮〕为主，

种子〔二级种子染菌〕次之，

而培养基消毒不透的情况较少。;2、防止染菌要点;〔2〕设备;〔3〕工艺操作;③连消

料液进入连消塔前需先预热。灭菌过程中，料液温度及其在维持罐停留的时间都必须符合要求，确保灭菌彻底。当冷却管开放冷水时，防止因突然冷却造成负压而吸入外界空气。为确保灭菌温度稳定，连消必须实现自动控制。;⑥无菌试验

无菌试验要严格取样操作，力求减少误差。应同时用肉汤和双碟作对照，以便迅速作出判断。当发现染菌时，要通过分辨菌型来探索菌源，并对杂菌做耐热试验考察。如果疑心种子罐染菌，那么种子不能轻率进发酵罐。;3、无菌检查与染菌的处理;〔2〕染菌的判断;〔3〕染菌率的统计;〔4〕染菌的处理;二、噬菌体污染的防治;1、噬菌体的污染源;◆工厂本身的排放物有时也给重复污染提供了噬菌体来源。生产过程中发酵气体排出，可以带有大量的生产菌。

◆在生产罐污染有少量噬菌体〔尚可进行生产〕时，噬菌体也被排到环境中，造成恶性循环。

◆废弃的发酵液处理不当可以成为难以对付的污染源。;2、噬菌体污染与发酵异常;一般来说，噬菌体污染引起的异常发酵有以下表现：

〔1〕污染较轻，或在发酵末期污染，那么使发酵过程减慢或降低发酵产率。也有的行业在这种情况下产率反而增高；

〔2〕在细菌对数生长期污染，而且污染量大，就会造成细菌溶解，发酵终止。

噬菌体污染后可以观察到糖消耗减慢，pH异常变化，产气减少，发酵稀薄，继之活的生产菌减少。通??测定可过滤性、传染性、宿主特异性、溶菌斑形成能力和电镜观察来鉴别异常发酵中的噬菌体。;3、噬菌体污染的防治;喷洒氯化物或杀藻胺(benzalkoniumchloride)气溶胶能杀灭活噬菌体，紫外线照射用作一种额外的保护措施。漂白粉(0.2%)、阳离子外表活性剂〔如季铵盐0.01%?0.1%〕和福尔马林〔1%〕均可单独使用，如果必要也可联合使用。;〔2〕选用抗噬菌体突变株;〔3〕使用抑制噬菌体复制的化学药物;◆有些噬菌体感染需要双价阳离子(Ca2+、Mg2+)吸附或DNA注射才能进行。使用络合剂可获得较好的效果，如0.2-0.3%多磷酸钠、0.1-0.2%肌醇六磷酸(phyticacid)、0.2-0.5%柠檬酸或草酸等可抑制乳糖发酵短杆菌的噬菌体。