《核酸合成与调控》课件.pptVIP

核酸合成与调控本课程探讨核酸合成与调控机制，将深入分析基因表达的分子基础，重点讲解核酸结构、合成过程与调控网络。通过系统学习，掌握当代分子生物学核心内容，为医学与生物技术应用奠定基础。

课程安排与学习目标1基础知识核酸结构与功能2合成机制DNA复制与RNA转录3调控网络表观遗传与非编码RNA4应用前景医学诊断与治疗策略

为什么学习核酸合成与调控基础研究价值理解生命本质解析遗传信息传递疾病诊断基因突变检测癌症早期筛查药物研发靶向治疗设计mRNA疫苗技术

历史回顾与研究进展1953年沃森克里克双螺旋模型1970年代DNA测序技术2000年代人类基因组测序2010年代CRISPR基因编辑

核酸的基本概念DNA遗传信息储存双链结构含脱氧核糖RNA遗传信息传递单链结构为主含核糖

核苷酸的结构组成碱基嘌呤：A、G嘧啶：C、T、U戊糖脱氧核糖（DNA）核糖（RNA）磷酸磷酸键能量储存骨架连接点

核酸的一级结构5端磷酸基团起始链中磷酸二酯键连接3端羟基末端

DNA双螺旋结构右手螺旋主沟与次沟交替排列碱基配对A=T（两个氢键）G≡C（三个氢键）反向平行链一条5→3，另一条3→5

RNA的多样性结构三维结构复杂功能折叠二级结构茎环、发夹、假结一级结构核苷酸序列

核酸的空间构象A型DNA脱水环境下右手螺旋，倾斜碱基对B型DNA生理条件下标准右手螺旋Z型DNA特定序列形成左手螺旋，锯齿状

核酸结构检测技术先进技术揭示核酸分子精细结构，推动结构生物学发展。

DNA的生物合成总览起始解旋酶打开双螺旋合成聚合酶延伸DNA链校对错误修复机制终止复制完成释放产物

复制起始点与复制叉850人类复制起始点数量确保高效复制30-50每个复制泡kb长度复制单位大小2复制叉数量双向延伸

DNA聚合酶种类与功能聚合酶主要功能特点I型修复5→3外切酶II型复制高保真度III型主要复制酶高速合成

引物与激活分子引物酶合成RNA引物5-10个核苷酸长度引物作用提供3-OH聚合酶起始点引物移除DNA聚合酶IRNA水解与替换

复制的起始、延长、终止起始蛋白复合物识别ori序列解旋双链DNA引物合成与延长引物酶与聚合酶协同作用dNTP参与链延伸终止与解离终止序列识别复制因子释放

前导链与滞后链合成前导链5→3方向连续合成单一引物滞后链方向相反不连续合成多个引物冈崎片段

拓扑异构酶与超螺旋I型拓扑酶单链断裂不需ATPII型拓扑酶双链断裂需要ATP超螺旋调节正超螺旋负超螺旋

DNA合成的校对与修复机制错误识别错配碱基检测切除3-5外切酶活性重新合成正确碱基添加基因组保护突变率控制在10^-9

RNA的生物合成(转录)起始RNA聚合酶结合启动子延长5→3方向链延伸终止终止子序列识别

原核与真核转录差异特征原核生物真核生物RNA聚合酶单一类型I/II/III型启动子-10/-35序列TATA盒等转录后处理极少复杂修饰

反转录作用与模板外合成反转录病毒HIV、HTLVRNA→DNA过程端粒酶端粒延长含RNA模板医学应用逆转录PCRcDNA文库构建

转录后修饰加帽5端甲基化鸟苷剪接内含子移除外显子连接加尾3端多聚A尾约200个ARNA编辑腺苷脱氨序列微调

核酸合成的时空调控G1期S期G2期M期

DNA合成的正向与负向调控正向调控生长因子激活细胞周期蛋白营养充足信号负向调控抑癌基因DNA损伤响应接触抑制

调控蛋白与调控元件转录因子结构域组织DNA结合模块激活/抑制功能启动子RNA聚合酶结合位点-10与-35区域转录起始点操纵子原核生物特有联合表达调控乳糖操纵子模型

调控基序与顺式元件顺式作用元件是基因组中的DNA序列，与反式作用因子结合，共同调控基因表达。

表观遗传调控1基因表达转录活性改变2染色质结构开放或压缩状态组蛋白修饰乙酰化、甲基化DNA甲基化CpG岛沉默

DNA损伤应答与调控损伤感知ATM/ATR激活细胞周期阻滞检查点蛋白激活修复启动修复酶募集恢复或凋亡p53决策路径

微小RNA与核酸合成调控前体转录pri-miRNA加工处理Drosha及DicerRISC复合物Argonaute蛋白靶基因抑制mRNA降解或翻译抑制

长链非编码RNA作用调控机制染色质修饰转录干扰功能多样性支架搭建分子诱饵疾病相关肿瘤发生神经退行性疾病特点长度200nt组织特异表达

治疗性核酸合成调控策略CRISPR/Cas9精准基因组编辑反义寡核苷酸特异mRNA抑制TALEN转录激活因子样核酸酶

细胞外信号影响调控

代谢状态与合成调控营养感知mTOR通路氨基酸感应能量状态AMPK通路ATP/AMP比例氧气水平HIF-1α稳定低氧应答昼夜节律时钟基因周期性表达

DNA合成抑制剂核苷类似物氟尿嘧啶(5-FU)阿糖胞苷干扰碱基配对拓扑异构酶抑制剂依托泊苷阿霉素阻断DNA解旋烷化剂环磷酰胺顺铂交联DNA链

抗生素对核酸合成的影