分子生物学第二章 染色体与DNA课件.ppt

分子生物学第二章M13RF的形成需要RNApolymerase发动合成一段RNA分子作为引物（RNA提供复制的3‘端）RF启动后，Rifalmpin的抑制无效实验结论（Conclusion）：Reiji等的实验证据－－每一冈崎片段都产生一个RNA－DNA接头分子生物学第二章DNAreplicationatphaseSofcellcycleE.coli37℃0.5h105bp/minS6-8hsM1hG23-4hsmammaliancell22-25hrs500-5000bp/minG112hs**分子生物学第二章第三节DNA的复制1.DNA的半保留复制 Watson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时即推测，DNA在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开，然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链，这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式为半保留复制。**分子生物学第二章第三节DNA的复制1.DNA的半保留复制 1958年，Meselson和Stahl研究了经15N标记3个世代的大肠杆菌DNA，首次证明了DNA半保留复制。**分子生物学第二章第三节DNA的复制2.复制的起点、方向和速度复制时，双链DNA要解开成两股链进行，使复制起点呈叉状，被称为复制叉。复制子为生物体DNA的复制单位。分子生物学第二章richATpalindromEnzymesbindingsite300bp±inreplicationorigin0fProkaryoteATrich分子生物学第二章“呼吸现象”DNA复制原点处氢键迅速断裂与再生，导致两条DNA链不断解链与聚合，形成瞬间的单泡状结构的过程。在富含AT的区域内尤为明显分子生物学第二章复制的多模式单起点、单方向多起点、单方向单起点、双方向多起点、双方向分子生物学第二章模式？单起点、双方向**分子生物学第二章第三节DNA的复制2.复制的起点、方向和速度复制时，复制叉从复制起点开始沿着DNA链连续移动，起始点可以启动单向复制或者双向复制。这取决于复制起点形成一个复制叉还是两个复制叉。如右图：**分子生物学第二章第三节DNA的复制2.复制的起点、方向和速度DNA复制时，复制方向有5’向3’复制，前导链连续合成，后随链合成不连续，形成冈崎片段。如图：分子生物学第二章子链DNA延伸方向DNApolymerasereactsonthe3’endonly5’OHTCATCAC5’OH3’NewDNAelongationfrom5’to3’directionpppOHC++ppi进化中保留的深刻的、选择与适应的、化学及功能的根源**分子生物学第二章第三节DNA的复制2.复制的起点、方向和速度DNA复制：复制起点是固定的，表现为固定序列，并识别参与复制起始的特殊蛋白质。复制叉移动的方向和速度虽多种多样，但以双向等速为主物种细胞内复制子数目/个平均长度/kb复制子移动速度/(bp·min-1)大肠杆菌1420050000酵母500403600果蝇3500402600爪蟾15000200500蚕豆35000300？**分子生物学第二章第三节DNA的复制3.复制的几种主要方式线性DNA双链复制如右图：环状DNA双链复制θ型滚环型D-环型**分子生物学第二章环状DNA复制θ型滚环型D-环型**分子生物学第二章第四节原核、真核生物DNA复制特点1.原核生物DNA复制的特点DNA双螺旋的解旋。首先在拓扑异构酶I的作用下解开负超螺旋，并由解链酶解开双链，接着由SSB蛋白来稳定解开的单链，以保证该局部结构不会恢复为双链。**分子生物学第二章DNA复制的引发。首先由引发酶（一种RNA聚合酶）在DNA模板上合成一段RNA链,接着由DNA聚合酶从RNA引物3’端合成新DNA链后随链的引发过程由引发体来完成分子生