中学生物微生物课程培训.pptVIP

关于中学生物微生物课程培训第1页，共41页，星期日，2025年，2月5日一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数培养基配制消毒灭菌土样稀释平板划线涂布平板菌落计数二、染色技术芽孢染色、革兰氏染色三、显微镜直接计数第2页，共41页，星期日，2025年，2月5日一、培养基六要素：碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子、水根据实验需要选用、设计最适合微生物生长的培养基。加富性的选择培养基（投其所好），固体培养基1、选择培养基配方：15.0g琼脂1.0g尿素10.0g葡萄糖0.2gMgSO4`7H2O2.1gNaH2PO41.4gKH2PO4水：1000ml第一专题土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第3页，共41页，星期日，2025年，2月5日培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。第4页，共41页，星期日，2025年，2月5日怎样证明此培养基具有选择性呢？培养基类型是否接种?目的?结果实验组对照组以尿素为唯一氮源的培养基胨牛肉膏蛋白培养基是分离尿素细菌判断该培养基有无选择性只生长尿素细菌生长多种微生物第5页，共41页，星期日，2025年，2月5日2、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配方（用于分离和培养细菌，是一种天然培养基）配方如下：牛肉膏3g蛋白胨10g氯化钠5g琼脂20g自来水1000mLpH7.4～7.6第6页，共41页，星期日，2025年，2月5日3、步骤：称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。调pH值：用NaOH或HCl调pH，用pH试纸对照。加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。分装：注意不要污染棉塞。包扎成捆，挂上标签,注明何种培养基。灭菌备用：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。第7页，共41页，星期日，2025年，2月5日第8页，共41页，星期日，2025年，2月5日二、消毒灭菌消毒：使用理化因素方法杀死物体表面绝大多数微生物的方法。灭菌：采用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物的方法。干热灭菌法：电热烘箱作为干热灭菌器高压蒸汽灭菌1.构造：（1）锅体：一般以2KW电热管作内热源，直接浸在锅内水中，通电后产生蒸汽。另附有支架，以承受内锅体。（2）内锅：由铝楹嵌接而成，用于承放待灭物品。底附有活动的栅格板，以防回流冷凝水将物品弄湿。其边上还有一用于插排气管的槽。（3）锅盖：上有木把手、安全阀、放气阀、压力表（4）其它：橡皮垫圈、旋钮等第9页，共41页，星期日，2025年，2月5日高压蒸汽灭菌法其步骤如下：

1.灭菌器内加入一定量的水，将包扎好的物品放入其中。

2.接通电源，进行加热

3.排除高压锅内的冷空气，可将排气阀打开，待排出大气后关闭排气阀；或关闭排气阀，待压力上升到0.5kg/cm2时再打开排气阀，待压力回复到0时再关闭排气阀。

第10页，共41页，星期日，2025年，2月5日4.当压力达1.05kg/cm2时，此时灭菌器内的温度为1210C，维持30min。对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、氨基酸等物时