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鱼腥藻异形胞的观察及诱导实验
厦门大学生命科学学院
实验目的
了解固氮蓝藻鱼腥藻7120的形态特征,掌握其
培养方法和实验操作技术。
利用光学显微镜观察鱼腥藻营养细胞和异形胞
的差异并设计实验诱导异形胞的形成。
蓝藻异形胞
异形胞:丝状蓝藻产生的一种与繁殖有关的特别类型的细胞,由营养细胞特
化而成的。圆形色淡,成熟的异形胞是透明的,其细胞壁在与相邻细胞相接
处有钮状增厚部(极节球)。具有异形胞的蓝藻能固氮,当水中氮缺乏时,异
形胞的数目显著增加。
蓝藻通过异形胞固定的氮,除供给藻细胞本身的生长发育外,还会通过含氮
化合物的分泌和藻细胞的分解,释放出大量的氨态氮,大大增加了水体和土
壤的肥力,在农业生产中具有重要的应用价值。
异形胞和普通的营养细胞特征比较
体积稍大
胞壁外有明显增厚而形成包被
细胞质中的颗粒状物质溶解消失
异形胞内不含藻胆素,但仍含叶绿素a
类囊体破碎,至细胞两端形成极球
核质分布均一
仅具光系统I(PSI),而不具能放氧的
光系统II(PSII)
呼吸速率较高,不能固定碳,内含有固
氮酶
异形胞一经形成就不再分裂,异形胞常
将藻丝分隔为藻殖段
异形胞分化的机制——细胞应激基因调控
鱼腥藻7120是一种丝状体固氮蓝藻,在氮源缺乏的情况下,大约每隔
10个营养细胞形成1个异形胞。异形胞的形成与氮源和光源等外界因素
密切相关,进而由基因调控异形胞的形成。
本实验将观察鱼腥藻异形胞的形成和探索影响其发育的环境因子。
图1固氮蓝藻鱼腥藻分化形成异型胞。图2当HetR第152位氨基酸突变后,鱼
腥藻无法形成异型胞。
实验材料
蓝藻:鱼腥藻Anabaenasp.PCC7120.
实验设备,仪器
普通光学显微镜,光照摇床
实验耗材
50ml三角瓶,纱布,载玻片,盖玻片
培养基
培养基为含氮或无氮的BG11(BG11)培养基
0
BG-11培养基配方如下[g/L]:
①NaNO1.5NaCO0.02
323
②MgSO•7HO0.075
42
③CaCl•2HO0.036
22
④柠檬酸0.006柠檬酸铁胺0.006EDTA•2Na0.001
⑤KHPO•3HO0.04
242
⑥1000倍微量元素母液:
HBO2.86MnCl•4HO1.81
3322
ZnSO•7HO0.222NaMoO•2HO0.3
42242
CuSO•5HO0.079Co(NO3)•6HO0.0494
4222
BG11无氮培养基(BG11)组成是把培养基中的NaNO替换为NaCl
03
实验步骤
1.显微镜观察提前准备好的在含有NaNO的BG11和以NaCl取代NaNO
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