24秋-25春人教版生物学选择性必修3 10 第二章 第2节 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体.docx

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第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体

学习任务目标

1．运用结构与功能观，理解动物细胞融合的原理和过程。

2．采用模型与建模等方法，以文字、图示的形式表示单克隆抗体制备的过程。

3．认同生物科技是一把双刃剑，认同动物细胞融合的潜在风险。

一、动物细胞融合技术

1．概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。

2．原理：细胞膜具有流动性。

3．诱导融合方法：PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。

4．意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。

二、单克隆抗体及其应用

1．单克隆抗体的制备过程(字母代表操作技术，数字代表细胞或物质名称)

(1)A操作是注射特定的抗原，目的是可以从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。

(2)杂交瘤技术选择融合的两种细胞为：①B淋巴细胞，②骨髓瘤细胞。

(3)过程B和C为诱导细胞融合的过程，获得的细胞③有多种(填“一种”或“多种”)。

(4)细胞③到细胞④的过程需要用特定的选择培养基进行筛选，只有④杂交瘤细胞才能生长，其他细胞不能生长。

(5)细胞⑤来源于细胞④(填数字序号)，细胞⑤为抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，其分泌的抗体能与特定的抗原结合。

(6)培养杂交瘤细胞的方法是注射到小鼠腹腔或D体外培养，从小鼠腹水或培养液中可提取⑥单克隆抗体。

2．单克隆抗体的应用

(1)作为诊断试剂。

(2)用于治疗疾病和运载药物。

1．[教材P48“相关信息”]灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？

提示：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。

2．[教材P50正文]单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是什么？

提示：单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备，因此被广泛用作诊断试剂。

1．植物体细胞杂交和动物细胞融合都利用了细胞膜的流动性。(√)

2．仅考虑细胞两两融合的情况，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型。(√)

3．动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。(×)

4．将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合，培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞。(×)

5．单克隆抗体诊断试剂提高了诊断的准确性、灵敏性。(√)

动物细胞融合和单克隆抗体的制备

[探究活动]

下图为单克隆抗体制备过程图。据图探究以下问题：

探究1．取B淋巴细胞前为什么要对动物进行注射特定抗原的处理？

提示：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原才能增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，产生相应的抗体。

探究2.仅从细胞两两融合的角度看，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后产生的细胞有几种类型？

提示：有3种类型，B淋巴细胞—B淋巴细胞融合的细胞，B淋巴细胞—骨髓瘤细胞融合的细胞，即杂交瘤细胞，骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞融合的细胞。

探究3.请写出图中两次筛选的目的。

提示：第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

探究4.制备单克隆抗体用到哪些生物工程技术？

提示：在制备单克隆抗体过程中用到的技术有动物细胞培养技术和动物细胞融合技术。

[评价活动]

1．将源自同品系小鼠的癌细胞和正常成纤维细胞融合，所获杂交细胞的后代只要保留成纤维细胞的某些染色体就可表现为正常表型，但若这些染色体丢失则会重新恶变为癌细胞。下列叙述不正确的是()

A．杂交细胞的后代保留的成纤维细胞的某些染色体上有抑制细胞恶性增殖的基因

B．利用灭活病毒可以诱导动物细胞融合

C．杂交细胞重新恶变后将失去接触抑制现象

D．染色体数目的变异会抑制细胞癌变

D解析：由题干信息“所获杂交细胞的后代只要保留成纤维细胞的某些染色体就可表现为正常表型，但若这些染色体丢失则会重新恶变为癌细胞”可推知，杂交细胞的后代保留的成纤维细胞的某些染色体上有抑制细胞恶性增殖的基因，A正确；诱导动物细胞融合可以用灭活病毒，B正确；癌细胞容易扩散和转移，具有无限增殖能力，失去接触抑制现象，杂交细胞重新恶变后将失去接触抑制现象，C正确；根据题意分析可知，抑制细胞恶性增殖的基因在成纤维细胞的某些染色体上，而不是染色体数目的变异会抑制细胞的癌变，D错误。

2．为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞染色体丢失的问题，研究者在单克隆抗体的制备过程中增加了一个步骤，如下图所示。除了抗原刺激之外，用EBV(一种病毒颗粒)感染动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。这样的细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷敏感。下列相关分析不合理的是()

A．杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降

B．B淋巴细胞来源于抗原刺激