2.2.1动物细胞培养课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

1.植物细胞培养的定义。2.动物细胞培养的定义。3.动物细胞培养的条件：①营养物质（添加血清等天然成分）②无菌无毒的环境③温度、PH和渗透压④气体环境（95%的空气和5%的CO2）课前记忆（课前3分钟，大声背诵，立即检查）

第2节动物细胞工程Part1动物细胞培养

课标要求：1.动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞的应用等技术2.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分数成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础学习目标：1.通过对动物细胞培养的学习，能够说出动物细胞培养的条件及其过程。2.通过对干细胞培养及其应用的学习，能够说出iPS的应用前景。

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51、动物细胞培养技术（基础）2、动物细胞融合技术3、动物细胞核移植技术动物细胞工程的基本技术

1、概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2、目的：获得大量细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。3、原理：细胞增殖（有丝分裂）那么，动物细胞的培养需要哪些条件呢？动物细胞培养一般用液体培养基，也称为培养液

一、动物细胞培养的条件糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境充足的营养、稳定的内环境将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分血清含有多种未知的促细胞生长因子，保证细胞能够顺利生长和增殖

8一、动物细胞培养的条件糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境①培养液、培养用具灭菌处理以及在无菌环境下进行操作；②添加抗生素，以防培养过程中污染；定期更换培养液，以便清除代谢物。①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________；③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。36.5±0.5℃7.2-7.4维持培养液的pH95%空气+5%CO2的CO2培养箱O2：细胞代谢所必需

疑难突破一：动物细胞培养的过程学生活动：构建动物细胞培养过程模型，并思考下列问题：（1）培养前用什么方法分散成单个细胞？（2）体外培养动物细胞有哪些类型？（3）什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？（4）什么是原代培养和传代培养？（5）为什么要进行分瓶培养？怎么处理？（6）动物细胞培养与植物组织培养有什么相同之处与不同之处？

动物细胞培养过程模型取动物组织分散成单个细胞悬浮生长贴壁生长传代培养细胞悬液原代培养细胞分裂受阻动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。

二、动物细胞培养的过程①悬浮生长类：②贴壁生长类：能够悬浮在培养液中生长增殖。需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。（大多数细胞）培养瓶或培养皿内表面的要求：光滑、无毒、易于贴附。大多数细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻；贴壁细胞在生长增殖时，除受上述因素的影响外，还会发生接触抑制现象。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。（3）体外培养的动物细胞类型分裂停止原因

（4）分瓶、进行传代培养①收集细胞悬浮生长类：直接用离心法收集贴壁生长类：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集②将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养。将分瓶后的细胞培养成为传代培养。【思考】动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶？第一次使用的目的是使组织细胞分散开；贴壁细胞传代培养时使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，分散成单个细胞，便于分瓶后继续培养。原代培养：传代培养：

比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的相同点获得细胞或细胞产物常用固体培养基植物体葡萄糖、动物血清常用液体培养基细胞增殖细胞的全能性许多细胞快速繁殖等蔗糖、植物激素1.培养过程中细胞都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；2.均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件二、动物细胞培养的过程比较植物组织