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卫星DNA的应用——DNA指纹同一种属中不同个体的高度重复顺序的重复次数不一样,这可以作为每一个体的特征,即DNA指纹。第62页,共84页,星期日,2025年,2月5日2)中度重复序列短分散片段(shortinterspersedrepeatedsegments,SINES):平均长度约300bp(500bp),拷贝距离为1000bp。拷贝数达10万左右。如Alu家族,Hinf家族。长分散片段(longinterspersedrepeatedsegments,LINES):平均长度为3500-5000bp,它们与平均距离为13000bp(个别长几万bp)。也有实验显示人基因组中所有LINES之间的平均距离为2.2kb,拷贝数一般在1万左右,如KpnⅠ家族等。中度重复顺序在基因组中所占比例在不同种属之间差异很大,一般约占10-40%,在人约为12%。第63页,共84页,星期日,2025年,2月5日单拷贝顺序在基因组中占50-80%,如人基因组中,大约有60-65%的顺序属于这一类;单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息,但只有一小部分编码各种不同功能的蛋白质;但单拷贝顺序中其他部份的功能尚不清楚。3)单一序列及低度重复序列第64页,共84页,星期日,2025年,2月5日自私DNA(selfishDNA)定义:在哺乳动物包括人类基因组中,存在着大量的非编码序列,如前述的高度重复顺序,内含子,间隔DNA等。这些顺序中,只有很小一部份具有重要的调节功能,绝大部部分都没有特殊功能。在这些DNA序列中虽然积累了大量缺失,重复或其他突变,但对生物并没有影响,它们的功能似乎只是自身复制,所以称为自私DNA或寄生DNA(parasiteDNA)。自私DNA也许有重要功能,但目前还不了解。第65页,共84页,星期日,2025年,2月5日三、染色体外遗传因子第66页,共84页,星期日,2025年,2月5日相关概念质粒(plasmid):可自我复制并遗传的染色体外DNA分子,细菌和某些低等真核生物中常见,可被用做基因工程载体。细胞质遗传(cytoplasmicinheritance):线粒体或叶绿体基因的遗传特性。第67页,共84页,星期日,2025年,2月5日3.1质粒(plasmid)质粒的存在:普遍存在于细菌中,如G+、G?、蓝细菌、放线菌;在真菌、藻类等真核生物中也存在。质粒的应用:基因工程载体。第68页,共84页,星期日,2025年,2月5日3.1.1质粒的一般生物学特性1、质粒的一般特性绝大多数为双链环状DNA分子,但也存在线形DNA质粒和RNA质粒(酵母杀伤质粒);质粒可稳定持续地游离于染色体外,但一定条件下可整合到染色体上;环形双链DNA三种构型:共价闭合环状、开环结构和线性分子。分子量差异显著,最小的质粒仅编码2-3种中等大小的蛋白质,其分子量大小为1-2?103bp,而巨大质粒(megaplasmid)分子量可达1-2?106bp。第69页,共84页,星期日,2025年,2月5日2、质粒的功能质粒赋予寄主细胞一些额外特性,如编码抗菌素和重金属抗性基因、产生抗菌素和细菌素的基因、芳香族化合物降解基因、诱发植物肿瘤基因,以及寄主控制的限制和修饰系统的基因等数十余种;隐蔽质粒(crypticplasmid):是指其功能尚不明了的质粒。第70页,共84页,星期日,2025年,2月5日3、质粒DNA的转移1)质粒的类型:根据是否可以转移,质粒可分为接合型质粒和非接合型质粒。二者都有自我复制基因;但前者带有控制细菌配对和质粒接合转移的基因,后者则缺。2)质粒接合转移细菌配对的形成:F-性须的形成与装配和维持交配期间细胞对的稳定均依赖于tra基因群;质粒的转移:TraY和TraI分别有单链切割和解旋酶的活性,以oriT为转移起点,在两种酶的作用下,一条链从给体细胞进入受体细胞,并进行新链的合成。第71页,共84页,星期日,2025年,2月5日质粒DNA的接合转移与复制TraY和TraI分别具有单链切割和解旋酶的活性,以oriT为转移起点,在两种酶作用下,一条链从给体细胞进入受体细胞经滚环复制合成新链。第72页,共84页,星期日,2025年,2月5日4、质粒DNA的复制类型按拷贝数的多少,质粒可分成两种复制型严紧型(stringent)质粒:拷贝数低,每细胞1-3拷贝;松弛型(relaxed)质粒:高拷贝数,每个寄主细胞中可高达10-60份拷贝一般来讲,接合型质粒分子量较大,每个细胞拷贝数少,属严紧型;非接合型质粒分子量较低,细胞中拷贝数较多,属松弛型。例外,接合型质

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