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第一章血液学一般检查
第一节概论血液一般检查的临床应用血液生理血液标本采集血液标本的抗凝血涂片的制备血细胞染色血细胞显微镜计数
01血液一般检查的临床应用02诊断与鉴别诊断03临床检验的结果是支持诊断、鉴别诊断、甚至确定诊断的主要依据。04例:anemia05依据:血中红细胞和血红蛋白量减少06leukemia07依据:血象和骨髓象08肾脏有实质性损伤的依据:09尿液中出现蛋白、细胞、管型
为预防疾病提供资料和职业病诊断提供依据如血象和肿瘤细胞学的普查等用于预防疾病、点彩红细胞计数用于铅中毒诊断。为临床安全用药提供保障及手术前准备。为分析病情、观察疗效、判断预后提供依据在疾病过程中,血液、体液、分泌物和排泄物也会随之发生相应的变化。如:尿中成分变化、ESR、网织红细胞等。
血液生理概要血液的组成有血细胞(45%)和血浆(55%)两部分组成。
血液生理概要血清与血浆的区别
血量占体重的6-8%,成人约4-5ml;(2)颜色来自血红蛋白01悬浮稳定性RBC膜上唾液酸根形成的Zeta电位的作用。02粘滞性血液的粘度主要取决于血细胞比容和血浆粘度。032、血液的主要理化性质血液生理概要
比重和渗透浓度:比重:全血为1.051~1.060;RBC约为1.090;血浆为1.025~1.030。血浆渗量为290~310mOsm/kg?H2oPH及凝固性:PH7.35~7.45血液的功能:运输、协调、维护内环境、防御。
物理抗凝01化学抗凝02生物抗凝03血液标本的抗凝
物理抗凝将血液注入有玻璃珠的小瓶中,不断地旋转摇动,使形成的纤维蛋白全部缠绕粘附于玻璃珠上,使血液不能凝固。适合于免疫学、细胞菌学、SLE等检验。
a.抗凝原理:螯合钙离子使用方法配成109mmol/L的浓度和血液1:9;若用于血沉试验为1:4c.适用范围:止血学检验、血沉、血液保养液(毒性小)。不适用于白细胞形态学检查(可导致白细胞形态改变)。12柠檬酸钠(枸橼酸钠)化学抗凝
适用范围:止血学检验使用方法草酸钠0.1mol/L和血液1:9抗凝原理:草酸钙沉淀CBA2.草酸钠(乙二酸的钠盐)化学抗凝
化学抗凝双草酸盐抗凝剂a.抗凝原理:草酸钙沉淀。使用方法:草酸钾0.8g,草酸铵1.2g(100ml)与血液1:10(80°C以下烘干)。适用范围:红细胞检验(红细胞比积、计数)。不适于血小板计数和白细胞分类计数(可导致血小板聚集及白细胞形态改变)。
抗凝原理:螯合钙离子使用方法:15g/L浓度EDTA和血液为1:10(血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂的用量为1.5~2.2mg/ml)适用范围:对血细胞形态影响小---血细胞计数;但影响血小板聚集和白细胞吞噬功能---不宜做止血学检验及血小板功能检验及制备血涂片等。4.乙二胺四乙酸(EDTA)盐化学抗凝
抗凝原理:低浓度时抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用,加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成,还能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用;高浓度时阻断凝血酶和纤维蛋白的反应。01b.适用方法:1g/L浓度的肝素钠与血液1:10025.肝素(含硫酸基团的粘多糖)生物抗凝
优点:抗凝能力强、不影响血细胞体积、不致溶血、能耐高温。适用范围:红细胞检验(红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比积)和多种生化分析。不适用于白细胞计数及分类计数(可使涂片产生蓝色背景、白细胞聚集)。生物抗凝
手工法血膜的评价标准:新玻片的处理旧玻片的清洁影响手工法血膜厚度的因素:血涂片制备的方法:血涂片制备
常用染色方法:瑞氏染色的原理瑞氏染液的组成:pH对细胞染色的影响:瑞氏染色的质量评价:常采用瑞氏染液的吸光度比值(RA)作为质量评价指标。且RA(A650nm/A525nm)=1.3±0.1为适宜成熟指数。血细胞染色
三、血细胞显微镜计数法原理用一定的稀释液将标本作定量稀释,混匀充入计数池中,在显微镜下计数一定容积中的血细胞数,经换算求得每升血液中的血细胞总数。可用于血液中细胞计数;尿液中细胞、管型计数;精液中精子计数等。
器材普通光学显微镜微量吸管改良Neubauer计数板盖玻片
1855年发明计数红细胞的计数板血细胞计数板法是最可靠和最经典计数技术改良Neubauer计数板
计数池
DCBA采血部位不当血液凝固稀释倍数不准充液不当E识别错误F器材不符合要求(一)、技术误差质量控制
(二)、固有误差(inherenterrors)泊森分布:SD=mCV=注:SD为标准差、m为计数的平均数、CV为变异系数。由此,计数范围大,计数细胞多
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