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核心考点突破考技案例导析考能双向训练专题二细胞工程(克隆技术)最新考纲热点提示1.植物组织培养Ⅱ2.动物细胞培养和体细胞克隆Ⅰ3.动物细胞融合和单克隆抗体Ⅱ4.胚胎干细胞的移植Ⅰ1.植物组织培养、植物体细胞杂交的过程及应用2.动物细胞培养、单克隆抗体的制备及应用3.动物细胞的培养与有毒物质的检测4.胚胎干细胞的特点及其实践应用植物组织培养与动物细胞培养的比较技术内容项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞的增殖培养基成分矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加剂(如甘氨酸、琼脂等),属于固体培养基葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等,属于液体培养基取材较幼嫩的细胞、组织、器官动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织培养过程培养结果可以获得植株,也可以获得大量细胞只能获得大量细胞,不能得到生物个体应用①植物快速繁殖②培育无病毒植株③生产细胞产品④制造人工种子⑤用于转基因植物的培育①生产蛋白质生物制品②培养皮肤移植的材料③检测有毒物质④用于生理、病理、药理学的研究相同点①都需人工条件下的无菌操作②都是合成培养基③都需适宜的温度、pH等条件①植物组织培养需要生长素和细胞分裂素,其中生长素可诱导愈伤组织生根,细胞分裂素可促进愈伤组织生芽。②在动物细胞的传代培养中,细胞可能癌变。③两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆,都不涉及减数分裂。④植物组织培养最终产生新个体,体现了细胞的全能性;动物细胞培养产生大量细胞,不形成新个体,故不能体现细胞的全能性。下列有关植物组织培养的叙述中,错误的是()A.花药、胚不能作为组织培养的材料B.植物细胞具有全能性C.外植体是指用于培养的植物组织或器官D.外植体可诱导出愈伤组织解析:考查了植物组织培养的有关知识。植物组织培养的理论根据是植物细胞的全能性。但是,在一个完整的植株上,各部分的体细胞只能表现一定的形态,承担一定的功能,这是由于受具体器官或组织所在环境影响的缘故。植物体的一部分一旦脱离原来所在的器官或组织,处于离体状态时,在一定的营养、激素等外界条件下,外植体(指从植物体上切下来的离体器官、组织或细胞)会进行细胞分裂,脱分化形成愈伤组织。将处于脱分化状态的愈伤组织移植到合适的培养基上继续培养,愈伤组织就会进行再分化,并形成具有根、茎、叶的完整植株。植物组织培养根据培养的对象,可以分为器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养和原生质体培养(用机械、酸处理或酶分解等方法除去细胞壁,分离出原生质体进行培养)等,胚是可以作为组织培养材料的。答案:A动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于()A.培养基不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞不能解析:动物细胞培养所用的培养基是液体培养基,其中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。而植物组织培养所用的培养基是固体培养基,通常含有水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等。可见,动物细胞养所用的培养基与植物组织培养的培养基是不相同的。答案:A植物体细胞杂交动物细胞融合(单克隆抗体制备)理论基础(原理)细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法(纤维素酶、果胶酶)去除细胞壁注射特定抗原使正常小鼠产生免疫反应促融①物理法:离心、振动、电刺激等;②化学法:聚乙二醇(PEG)①物化法:与植物细胞融合相同;②生物法:灭活的病毒过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体融合(物化法)动物细胞融合第三步杂种细胞的筛选与培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株诱导与鉴定单克隆抗体的提纯植物体的细胞杂交与动物细胞融合的比较意义和用途①克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围;②突破有性杂交的母系遗传,获得细胞质基因的杂合体,研究细胞质遗传①制备单克隆抗体;②诊断、治疗和预防疾病,例如:肿瘤;→肿瘤;抗癌药物→抗癌药物→肿瘤(1)在细胞融合时,可出现多种杂种细胞,如B细胞—B细胞,骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞,B细胞—骨髓瘤细胞。(2)动物细胞融合和植物体细胞杂
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