第四章2___病毒的遗传与变异.ppt

（二）移码突变：造成突变位点下游多个密码子的错读，可影响多个氨基酸，影响明显。缺失突变是指病毒基因组的一部分被丢失，从而使病毒的特性发生改变。如果缺失的那部分核酸序列是无关紧要的，那么病毒的表型不会受到明显影响；如果是关键部分，则病毒将失去独立繁殖的能力，甚至是致死性的。*第二节.病毒基因重组2.1.病毒的重组机制病毒重组:两个或多个病毒颗粒的遗传物质重配于子代重组体病毒中,病毒重组体含有两个或多个亲代病毒基因的核酸序列,出现与亲代病毒不同的基因型和表型.*重组‘classic’recombinationcommoninDNAviruses*病毒的重组机制动物病毒重组机制有三种:分子内重组:单一分子基因组病毒(DNA或RNA),核酸分子断裂与其他核酸分子再连接.拷贝选择重组:RNA聚合酶选择性地连接到静止模板链上进行RNA子代链的合成.基因重配:发生在分段基因组的RNA病毒.没有核酸分子共价键的破坏,是分段基因组病毒之间核酸片段的交换,基因组各片段在子代病毒中随机分配.流感病毒属于此种类型。*病毒的重组类型1.活病毒间的重组2.灭活病毒间的重组3.死活病毒间的重组*病毒的重组类型1.活病毒间的重组例如流感病毒两个亚型之间可基因重组，产生新的杂交株，即具有一个亲代的血凝素和另一亲代的神经氨酸酶。这在探索自然病毒变异原理中具有重要意义。流感每隔十年左右引起一次世界性大流行，可能是由于人的流感病毒与某些动物(鸡、马、猪)的流感病毒间发生基因重组所致。*病毒的重组类型2.灭活病毒间的重组例如用紫外线灭活的两株同种病毒，若一同培养后，常可使灭活的病毒复活，产生出感染性病毒体，此称为多重复活(Multiplicityreactivation)。*表型混杂nochangesingenomepossiblyalteredhostrangepossiblyresistanttoantibodyneutralization*表型混杂转壳现象极端情况*缺陷病毒缺陷病毒:基因组在一个或多个病毒自我复制必需基因上缺乏功能,它的复制需其它病毒基因组或能复制和突变病毒的基因提供辅助活性.整合缺陷基因组:许多动物病毒不能自我复制,需整合到宿主细胞中，它的DNA能引起正常细胞功能发生深刻而持续的变化，利用宿主细胞完成病毒的复制。*病毒变异的实际意义1.研制减毒活疫苗如ts株、宿主适应性突变株的研制。2.应用于基因工程(Geneticengineering)基因工程是将一个生物体的基因(Gene)，也就是携带遗传信息的DNA片段，转移到另一个生物内，与原有生物体的DNA结合，实现遗传性状的转移和重新组合，从而使人们能够定向地控制、干预和改变生物体的变异和遗传。目前病毒基因工程正沿着二个方向发展：一是将编码病毒表面抗原的基因移植到质粒中去，在大肠杆菌中产生大量表面抗原物质，以制备疫苗或诊断用抗原。如乙型肺炎病毒编码表面抗原的DNA片段已在酵母菌中表达，该疫苗正进行人体观察；二是探索病毒作为基因工程载体的可能性，以便将所需要的外源基因带入人体或者物体内，以治疗人类遗传疾病或创造动物新品种的目的。*如何利用病毒突变和重组建立病毒生物学研究的有效方法，如何利用重组病毒构建重要疾病基因治疗载体，是研究病毒遗传和变异的主要目的之一。在病毒基因功能研究中，经典的互补试验、克隆基因的互补试验及利用突变和重组进行的顺式因子分析、反式因子分析和基因瞬时表达，都有着不可替代的作用。由于一些病毒可以感染动物和人类的特异组织细胞，利用这些病毒构建表达外源基因载体，用于人类一些特殊疾病的基因治疗，这一方面具有诱人的前景。

*哺乳动物病毒表达载体4.1.瞬时表达病毒载体来源于裂解性病毒载体:使一个病毒或细胞基因进入动物细胞的基因运输工具.能引导多拷贝目的基因进入几乎每个培养细胞.瞬时表达载体:当病毒进行裂解性复制时,能够在短时间内表达它们基因的载体.*4.1.瞬时表达病毒载体瞬时表达的病毒载体有:①乳多空病毒载体:SV40,优点对各种突变血凝素基因表达研究具有较高的价值.不足点外源DNA插入在病毒的必需基因中,所以需要辅助病毒才能复制;SV40包装的DNA分子小(最大为5243bp).*4.1.瞬时表达病毒载体②腺病毒载体优点能包装大分子量的外源DNA片段(非必须基因可被替代);不需辅助病毒;它能感染哺乳动物的许