生物化学：第32章 RNA 的生物合成和加工.ppt

SplicingbranchsiteSplicingcatalyticcenter（4）tRNA前体的拼接酵母tRNA约有400个基因，有内含子的基因约占1/10，内含子长度14-46bp。切除内含子的酶识别tRNA的二级结构。tRNA拼接2)反式拼接和选择性拼接反式拼接：前体RNA分子间的拼接选择性拼接(Alternativesplicing)：一个基因的转录产物在不同发育阶段或生理状态下，通过不同拼接方式得到不同的mRNA和翻译产物。在基因表达调控中起重要作用。Alternativesplicing2.RNA的编辑和再编码1)RNA编辑及生物学意义RNA编辑：RNA序列中少数碱基（U为主）的插入、替代或删除现象。意义:a）消除DNA水平上的不利突变 b）增加基因产物的多样性 c）基因调控的一种方式 d）编码产生新的功能蛋白，有利于进化 2）再编码:突变的mRNA编码信息通过在tRNA反密码子水平上得以矫正（了解）（四）RNA的生物功能多样性传递遗传信息，决定蛋白质的生物合成。由rRNA,tRNA,mRNA合作完成。催化功能：核酶（ribozyme)（GilbertW.1986)各类小RNA参与转录后加工和修饰调节基因表达和细胞功能（例：反义RNA的作用）进化中的作用？二、RNA转录后的加工（Posttranscriptionalprocessing)RNA聚合酶合成的原初转录产物，经过剪切、修饰、拼接等过程，转变成成熟的RNA分子，此过程称RNA转录后的加工。（1）原核、真核的tRNA、rRNA需要转录后加工在细胞内所有的tRNA、rRNA都不是原初转录产物。原初转录产物的5’是三磷酸（pppG、pppA），而成熟的tRNA、rRNA，5’是单磷酸。成熟tRNA、rRNA分子都比原初转录物小。所有的tRNA分子，都有原初转录物所没有的稀有碱基（A、G、C、U以外的碱基）。证据：（2）原核mRNA的加工绝大多数原核mRNA无需加工原核生物基因以多顺反子为单位转录，半衰期只有几分钟。如果一种酶或蛋白质不再需要时，只需简单地关闭其mRNA的合成就行了。这是原核生物重要的调控机制少数多顺反子构成的mRNA，由核酸内切酶切成较小的mRNA，然后再进行翻译（3）真核的mRNA需要转录后加工单顺反子、多内含子，寿命比原核mRNA的长。内含子（intron）：在原初转录物中，通过RNA剪接反应而被去除的RNA序列，或基因中与这种序列对应的DNA序列。外显子（exon）：原初转录物通过RNA拼接反应后，而保留于成熟RNA中的序列，或基因中与成熟RNA对应的DNA序列。EukaryotemRNA（一）原核生物RNA的加工过程（不要求）在原核生物中，rRNA基因与某些tRNA基因组成混合操纵子，可提高效率、节省空间（增加有效信息）。其它的tRNA基因也成簇存在，并与编码蛋白质的基因组成操纵子，它们在形成多顺反子转录物后，断裂成为rRNA和tRNA的前体，然后进一步加工成熟。1.原核rRNA前体的加工（E.coli）E.coli共有三种rRNA。5SrRNA120b16SrRNA1541b23SrRNA2904b图：大肠杆菌rRNA加工过程2.原核tRNA前体的加工E.Coli基因组有60个tRNA基因，即某种氨基酸的tRNA基因不止一个拷贝。tRNA前体加工步骤：1）核酸内切酶（RNAaseP、RNAaseF）在tRNA两端切断。2）核酸外切酶（RNAaseD）从3’端逐个切去附加序列。3)tRNA核苷酰转移酶在tRNA3’端加上-CCA-OH。4)核苷的修饰（修饰酶）甲基化酶S-腺苷蛋氨酸（SAM）。tRNA前体的加工3.部分原核mRNA前体的加工(不要求）由单顺反子构成mRNA，一般不需加工。一经转录，即可直接进行翻译。有些多顺反子构成的mRNA，由核酸内切酶切成较小的mRNA，然后再进行翻译。例：核糖体大亚基蛋白L10、L7、L12与RNA聚合酶β、β’亚基的基因组成混合操纵子。它在转录出多顺反子mRNA后，由RNAaseⅢ将核糖体蛋白质基因与聚合酶亚基基因的mRNA切开，然后各自翻译。（二）真核生物RNA的加工1.真核rRNA前体的加工（了解）真核生物核糖体小亚基：16-18SrRNA，大亚基：26-28SrRNA、5SrRNA、5.8SrRNA。真核rRNA基因拷