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微生物实验室生物安全操作规程
一、目的
制订本规则,保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫
生以及防止对外界环境造成污染。
二、适用范围
适用于所有进入微生物实验室人员。实验室工作人员必需严格
遵守安全操作规程。
三、安全操作规程:
1.员工安全操作规程
1.1实验室入口处须贴上生物危险标志,注明危险因子、生物安
全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的
程序。
1.2禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实
验室负责人批准后方可进入,做好卫生防护,并在有关人员陪同下方
可进入,同时注意做好环境维护及保密工作。
1.3进行感染性实验时,禁止他人进入实验室,或必须经实验室
负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员
必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。
1
1.4接触微生物或含有微生物的物品后,脱掉手套后和离开实验
室前要洗手。
1.5禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。
1.6尽量以移液器吸取液体,禁止口吸。
1.7实验过程中,严格按有关操作规程操作,降低溅出和气溶胶
的产生。
1.8每天至少消毒一次工作台面,活性物质溅出后要随时用75%
乙醇或巴氏消毒液消毒。
1.9实验人员在配制培养基过程中,需尽量避免接触性或吸入性
危害,特别是配制TTB和碘液等对人体有害的培养基或试剂时,要穿
戴工作服、口罩和手套,并在通风橱中进行。
1.10工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、
卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训,掌握预防
暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露
于感染性物质时,及时向实验室负责人汇报,并记录事故经过和处理
方案。
1.11禁止将无关动物带入实验室。
2.无菌室安全操作规程
2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布
2
专用),紫外线照射消毒30min以上,超净工作台台面每次实验前要
用75%酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液
缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。
2.2无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%
的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液,等等。
2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁
净度符合要求。
2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品,均应包扎严
密,并应经过适宜的方法灭菌。
2.6工作人员进入无菌室前,必须用肥皂或消毒液洗手消毒,然
后在缓冲间更换专用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75%乙醇
等消毒剂再次擦拭双手),方可进入无菌室进行操作。
2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟,灭
菌后通无菌风至少30min以上人员才能进入。操作完毕,应及时清理
无菌室,再用紫外灯辐照灭菌30分钟。
2.8供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。
检查前,用75%的酒精棉球消毒外表面。
2.9每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠
3
性。
2.10吸取菌液时,必须用移液器吸取,切勿直接用口接触吸管。
2.11接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,
方可接种培养物。
2.12带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来
苏尔溶液或巴氏消毒液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗。
2.13如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或3%
的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟,再做处理。工作衣帽等受到
菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤。
2.14凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,
严禁污染下水道。
2.15无菌室应每月检查菌落数。在层流无菌风开启的状态下
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