生物分离技术自己的笔记.pdfVIP

分派系数m:

〃?=q/q

式中,cs和cm分别为组份在固定相和流动相中的浓度。

m类型:A.B型曲线是一条典型的吸等温线，吸色谱法属于这类曲线。C和D型吸等温线很少碰到。

C曲线为线性分派等温线。

线性色谱：溶质浓度低时,m为常数时的色谱

意义：容易理解，溶质流过色谱柱时,m大的组份通过色谱柱所需要的时间长,m小的组份需要的时间短;

当样品中各组份在两相的m不同时，就能实现差速迁移，达成分离的目的。

按原理分类P（122掌握）

旗掾牖涌趟分醐懈

麻能般质都邠划涮靴

・删艳诰法

施解法桶m

触作胭崎蛹樵鞅帏融鼾郎

，撇解法惴懿分积寸

物秣爆法寐枷的域将邳植糊无酬靴

吸等温线

当吸剂与溶液中的溶质达成平衡时，其吸量q*同溶液中溶质的平衡应与温度有关。

当温度一定期，吸量只和浓度有关,q*=fc（）—吸等温线。

几种常见的吸防等温线

1-Henrv型i2—Freundlich型；

3-Lngmuir型:4一矩形

A）、Henrytype

在一定温度下，平衡时吸剂吸溶质浓度q*与液相溶质浓度c之间的关系为线性函数:

q=me

m为分派系数。

适应条件：在低浓度范围之内成立。当浓度较高时，上式无效。

B)、Freundlichtype

其经验公式为

夕=kc

其中,k和B为常数，B一般在0.1/之间。当吸剂对溶质的吸作用非常大的时候，B也许小于0.1,

此时游离浓度对吸浓度的影响很小。

Freundlich等温线可以描述大多数抗生素、类固醇、的类激素等在溶液中的吸过程。

C)^Lngmuirtype

1+，

当吸剂对溶质的吸作用非常大时，这时存在30.1,或用前式表达Kb非常大，这时游离的溶质浓度

对吸浓度影响极小，接近不可逆吸。

D)、Rectngletype

如在固定化单克隆抗体的免疫亲和吸中，一般存在B0.1。

1.塔板理论(pltetheory)

塔板理论的假设：

(1)在每一个平衡过程间隔内.平衡可以迅速达成；

(2)将载气看作成脉动(间歇)过程；

(3)试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；

(4)每次分派的分派系数相同，

n称为理论塔板数(iheoreticalplalenumber)。与精播塔同样，色谱柱的柱效随理论塔板数n的增长而增长，随

塔板高H的增大而减小。

n=L/H

n与半峰宽及峰底的关系式为：

•式中•或（Y1/2）应采用同一单位时（间或距离）。上式示：在IR一定期，假如色谱峰越窄，则说明n越

大,H越小，柱效能越高。

在实际工作中，按上式计算出来的n和H值有时并不能充足地反映色谱柱的分离效能，由于采用IR计算时,

没有扣除死时tM,所以，常用有效塔板数n有效表达柱效：

%=U%

有效塔板高为:

例2已知一根1米长的色谱柱的有效塔板数为1600块，组份A在该柱上的调整保存时为100秒，试求

A峰的半峰宽及有效塔塔板高度。

解图卜偌=1°°儒=5%器

塔板理论的特点和局限性

1（）当色谱柱长度一定期，塔板数n越大塔（板高度H越小），被测组分在柱内被分派的次数越多，柱效能

则越高，所得色谱峰越窄。

2（）不同物质在同一色谱柱上的分派系