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第4节蛋白质工程的原理和应用第三章基因工程本节聚焦1.蛋白质工程的基本原理是什么?2.蛋白质工程已有哪些实际的应用?
为什么这些细菌会发出不同颜色的荧光?因为在它们的体内导入了荧光蛋白的基因。最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白改造黄色荧光蛋白及其他颜色的荧光蛋白这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用。这个团块就是长在患儿肝脏上的肿瘤科学家如何对天然的绿色荧光蛋白进行改造?对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的。
基因工程的实质和不足:基因工程实质:将一种生物的基因转移到另一种生物体内,后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新性状。原则上只能产生自然界已存在的蛋白质(天然蛋白)基因工程的缺陷有时不完全符合人类生产和生活需要天然蛋白的缺陷对天然蛋白进行改造,产生更符合人类需要的蛋白质蛋白质工程怎么改造?是直接改造蛋白质分子,还是改造基因?为什么?
以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。基础操作方法及对象结果目的蛋白质工程的实质:蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程,是涉及多学科的综合科技工程。
一、蛋白质工程崛起的缘由赖氨酸产量提高赖氨酸合成时需:天冬氨酸激酶;二氢吡啶二羧酸合成酶。达到一定浓度抑制酶活性异亮氨酸苏氨酸(352位)异亮氨酸天冬酰胺(104位)实例:利用蛋白质工程提高玉米赖氨酸含量提高5倍提高2倍赖氨酸含量低
一、蛋白质工程崛起的缘由蛋白质工程的目标根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造。改造蛋白质的方法改造或合成基因为什么蛋白质工程改造基因而不直接改造蛋白质?①蛋白质的高级结构十分复杂,直接改造难度大;②蛋白质是由基因编码的,改造了基因可以间接改造蛋白质;③基因可以遗传,蛋白质无法遗传。
转录DNARNA翻译肽链逆转录复制复制折叠等具有空间结构的蛋白质表达生物特有的功能或性状按照中心法则进行天然蛋白质合成过程:二、蛋白质工程的基本原理
蛋白质工程的基本思路①预期的蛋白质功能②设计预期的蛋白质结构③推测应有的氨基酸序列④找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因⑤获得所需蛋白质预期功能生物功能设计推测改造或合成行使折叠目的基因转录mRNA翻译多肽链蛋白质(三维结构)思路逆中心法则,与天然蛋白质合成的过程相反二、蛋白质工程的基本原理
二、蛋白质工程的基本原理蛋白质工程基本思路的应用已知某多肽链的一段氨基酸序列是:丙氨酸…………色氨酸赖氨酸苯丙氨酸讨论:1.怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。查密码子表得知:丙氨酸(GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG)、谷氨酸(GAA、GAG)、苯丙氨酸(UUU、UUC)。推知mRNA序列为:GCU(或C或A或G)UGGAAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)先根据氨基酸序列找到对应的密码子推测出mRNA上的核糖核苷酸序列推出一条脱氧核糖核苷酸序列推出DNA的核苷酸序列
二、蛋白质工程的基本原理蛋白质工程基本思路的应用讨论:1.怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。推知mRNA序列为:GCU(或C或A或G)UGGAAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)脱氧核苷酸序列:GCT(或C或A或G)TGGAAA(或G)GAA(或G)TTT(或C)CGA(或G或T或C)ACCTTT(或C)CTT(或C)AAA(或G)2.确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因?可以人工合成目的基因,或应用基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等进而改造基因。
二、蛋白质工程的基本原理拓展延伸可以人工合成目的基因,或应用基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等进而改造基因。根据改造蛋白质的部位的多少,对蛋白质的改造可分为三类:(1)大改:设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质(2)中改:在蛋白质分子中替换某一个肽段或某一个特定的结构域。(3)小改:改造蛋白质分子中的几个氨基酸残基2.确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因?
二、蛋白质工程的基本原理
比较项目基因工程蛋白质工程区别起点过程实质结果联系生产自然界中已存在的蛋白质生产自然界中非天然的蛋白质定向改造生物遗传特性,以获得人类所需要的生物类型或生物产品改造或制造人类所需要的蛋白质预期的蛋白质功能目的基因获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新
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