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(2)负控阻遏系统--阻遏蛋白与效应物结合时,结构基因不转录。第62页,共111页,星期日,2025年,2月5日调控模式1、可诱导负调控2、可诱导正调控3、可阻遏负调控4、可阻遏正调控第63页,共111页,星期日,2025年,2月5日第64页,共111页,星期日,2025年,2月5日大肠杆菌乳糖操纵子的负调控(一)大肠杆菌的乳糖利用系统大肠杆菌的乳糖代谢需要有β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的催化。这种酶能把乳糖水解为半乳糖和葡萄糖.另外有半乳糖苷透性酶和巯基半乳糖苷转乙酰酶。三种酶协同作用,使得乳糖得以分解和利用。第65页,共111页,星期日,2025年,2月5日项目功能结构基因3个不同结构基因能够产生3种不同的酶.操纵基因是结构基因的开关.通过对RNA聚合酶阻抑与否来控制结构基因的转录或停止.启动子是RNA聚合酶与DNA结合的部位,可识别转录起始点.调节基因能产生阻抑物.通过阻抑物与操纵基因的结合与否来控制操纵基因的关闭和开启乳糖操纵子的结构和功能第66页,共111页,星期日,2025年,2月5日(二)乳糖操纵子的调控机制1、没有乳糖时,具有活性的阻遏物和操纵基因结合,转录不能进行。2、有乳糖时,乳糖与阻遏物结合,使阻遏物发生构象变化而失活,不能与操纵子结合,结构基因正常转录,进而再翻译出蛋白质。第67页,共111页,星期日,2025年,2月5日原核生物基因表达的调控乳糖代谢基因表达调控图解:(没有乳糖时)RPOlacZlacYlacA调节基因启动子操纵基因结构基因RNA聚合酶信使RNA转录翻译阻抑物与操纵基因结合,结构基因转录受阻.阻抑物第68页,共111页,星期日,2025年,2月5日原核生物基因表达的调控乳糖代谢基因表达调控图解:(有乳糖时)RPOlacZlacYlacA调节基因启动子操纵基因结构基因RNA聚合酶信使RNA转录翻译阻抑物与乳糖结合后构象发生了改变,因而不能与操纵基因结合,使得结构基因进行转录。阻抑物乳糖转录半乳糖苷酶酶酶乳糖分解代谢调控过程是一个自我调控过程第69页,共111页,星期日,2025年,2月5日四、大肠杆菌乳糖操纵子的正调控1、葡萄糖敏感操纵子有一些控制某一种糖如乳糖、半乳糖、阿拉伯糖和麦芽糖等分解代谢的操纵子,当培养基含有葡萄糖时,会阻止这些操纵子的功能,称为葡萄糖敏感操纵子。例如:当大肠杆菌生长的培养基中既有葡萄糖又有乳糖的条件,只利用葡萄糖,而不利用乳糖。换句话说,只要在培养基中有葡萄糖存在,便可抑制了利用其他各种酶的产生,称为分解物阻遏。第70页,共111页,星期日,2025年,2月5日2、CAP-cAMP调控另外一种起调节作用的诱导物为cAMP(环化腺苷酸)分析一组实验几种情况:(1)当培养基中含用大量葡萄糖时,cAMP水平明显下降。(2)当以乳糖为唯一碳源时,β-半乳糖苷酶的合成增加。第71页,共111页,星期日,2025年,2月5日(3)当有乳糖和葡萄糖为碳源时,如果加入cAMP,β-半乳糖苷酶的合成速率大大提高。结论:cAMP浓度能影响到β-半乳糖苷酶的合成速率。主要是cAMP能激活CAP(分解物基因激活蛋白),起转录因子的作用。第72页,共111页,星期日,2025年,2月5日3、lac操纵子的正调控机制(1)cAMP-CAP复合物与DNA结合,改变DNA结构,促进RNA聚合酶和启动子结合,使转录能力增强。(2)cAMP-CAP复合物的形成取决于AMP的浓度,当以葡萄糖为能源时,由于其抑制腺苷酸环化酶的活性,ATP不能转化为cAMP,cAMP浓度下降,不能形成cAMP-CAP复合物,乳糖结构基因不能被转录。因为细胞中有葡萄糖作为能源,就没有必要需要对乳糖利用的几种酶了。第73页,共111页,星期日,2025年,2月5日第74页,共111页,星期日,2025年,2月5日在原核生物中,大多数基因表达通过操纵子模型进行调控,其顺式作用元件主要由启动基因、操纵基因和调节基因组成。在真核生物中,与基因表达调控有关的顺式作用元件主要有启动子(promoter)、增强子(enhancer)和沉默子(silencer)。真核生物中基因表达的调控机制较原核生物复杂得多,许多细节还未弄清楚。就人类染色体DNA而言,就有
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