液相色谱讲义六液相色谱的定性定量分析.pptVIP

液相色谱讲义六液相色谱的定性定量分析第1页，共26页，星期日，2025年，2月5日用保留时间定性用“标样”的保留值定出被测组份的位置第2页，共26页，星期日，2025年，2月5日进一步的确认标准加入同时用其他方法其他色谱方法（改变机理，如：用不同的色谱柱）其他检测器PDA，光谱图比较、谱库检索MS，质谱图解析、谱库检索其他仪器方法第3页，共26页，星期日，2025年，2月5日标准加入法举例废水样品中五氯苯（PCP）的分析梯度曲线梯度曲线PCP4ppm3ppm2ppm1ppm第4页，共26页，星期日，2025年，2月5日峰一致性的确认确认色谱峰的纯度保证每个色谱峰下只有一个被测的组份检查是否有共流出的物质（杂质）干扰色谱峰纯度确认的方法用光电二极管矩阵检测器比较光谱图峰纯度鉴定，双波长Ratio996的纯度角理论第5页，共26页，星期日，2025年，2月5日用二极管矩阵检测器比较光谱图苯的色谱及光谱图（Index）第6页，共26页，星期日，2025年，2月5日996的纯度角理论996的纯度角理论可快速得到纯度结果第7页，共26页，星期日，2025年，2月5日定量分析的具体内容确定样品的类型，主要成分/痕量成分使分析条件的分离度（R）大于：1.5色谱峰的定性，峰一致性测定检测限及定量限：确定灵敏度及线性范围用标样建立标准曲线检查方法的准确度及精确度用标样定期检查方法第8页，共26页，星期日，2025年，2月5日痕量分析如信/噪比不够，定量的精确度会受影响，因此要：分析前浓缩样品选择高灵敏度检测器用衍生法使色谱体系最优化使用短的微径柱（减少样品的稀释）使用高效色谱柱使k值尽可能小增加进样体积和浓度使用低流速（N增加）采用梯度淋洗第9页，共26页，星期日，2025年，2月5日液相色谱定量的精度测量的精度第10页，共26页，星期日，2025年，2月5日定量的准确度误差∶E=O-TO∶观测到的值T∶真值第11页，共26页，星期日，2025年，2月5日液相色谱定量精度的计算测量精度的计算第12页，共26页，星期日，2025年，2月5日准确度的衡量色谱方法是相对定量方法，如不考虑损失及杂质干扰等的因素，其结果同“标样”的准确程度关系密切一般的衡量方法是做回收率实验或不同方法之间的比较：相关系数相关系数：其中，X及Y分别代表不同方法的实验值及平均值第13页，共26页，星期日，2025年，2月5日准确度的影响因素标样的可靠性及其配制的准确度色谱方法的可靠性色谱泵的精确度（GPC的影响更大）进样器的准确度，进样技术第14页，共26页，星期日，2025年，2月5日流速与检测面积的关系如在不改变系统效率的情况下，流速降低峰高几乎不变，然而峰面积与流速相应成反比增加。第15页，共26页，星期日，2025年，2月5日溶剂强度、K及峰高的关系第16页，共26页，星期日，2025年，2月5日柱效和峰高的关系如其他因素不变，如：K‘，a，流速等，柱效增加峰面积基本不变，而峰高增加。第17页，共26页，星期日，2025年，2月5日常用的定量方法峰面积百分比法由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用外标法在液相色谱中用的最多内标法准确，但是麻烦在标准方法中用的最多第18页，共26页，星期日，2025年，2月5日外标法定量配制一系列已知浓度的标样第19页，共26页，星期日，2025年，2月5日