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第31页,共83页,星期日,2025年,2月5日第32页,共83页,星期日,2025年,2月5日第33页,共83页,星期日,2025年,2月5日第34页,共83页,星期日,2025年,2月5日第35页,共83页,星期日,2025年,2月5日第36页,共83页,星期日,2025年,2月5日第37页,共83页,星期日,2025年,2月5日方法编辑、保存第38页,共83页,星期日,2025年,2月5日第39页,共83页,星期日,2025年,2月5日第40页,共83页,星期日,2025年,2月5日第41页,共83页,星期日,2025年,2月5日第42页,共83页,星期日,2025年,2月5日第43页,共83页,星期日,2025年,2月5日第44页,共83页,星期日,2025年,2月5日第45页,共83页,星期日,2025年,2月5日第46页,共83页,星期日,2025年,2月5日第47页,共83页,星期日,2025年,2月5日第48页,共83页,星期日,2025年,2月5日第49页,共83页,星期日,2025年,2月5日第50页,共83页,星期日,2025年,2月5日第51页,共83页,星期日,2025年,2月5日第52页,共83页,星期日,2025年,2月5日第53页,共83页,星期日,2025年,2月5日第54页,共83页,星期日,2025年,2月5日第55页,共83页,星期日,2025年,2月5日第56页,共83页,星期日,2025年,2月5日第57页,共83页,星期日,2025年,2月5日第58页,共83页,星期日,2025年,2月5日第59页,共83页,星期日,2025年,2月5日第1页,共83页,星期日,2025年,2月5日高效液相色谱法 液相色谱是色谱中的一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相。对于大量有机化合物、离子型化合物以及易受热分解或失去活性的物质,不能直接或不适合用气相色谱方法进行分析,因此高效液相色谱的应用领域不断扩大和深入。特别是近几十年来,液相色谱固定相的高度发展,仪器不断更新,高效液相色谱目前已成为许多学科科学研究和日常分析的重要手段。第2页,共83页,星期日,2025年,2月5日一、高效液相色谱法的特点1、高效液相色谱可以分离分析高极性,高分子量和离子型的各种物质,只要被分析对象能够溶解于可作为流动相的溶剂中并能够被检测,就可以直接进行分析。某些目前尚不能被直接检测,或检测灵敏度不够的,也可以采用各种衍生技术,实现这些物质的检测。2、高效液相色谱仪主要由高压输液泵、进样阀、柱子和检测器等组成。3、柱子的柱效(以理论板数计)很高,每米可达3万块以上。一般只使用20~25cm长的柱子。由于填料的不断发展和改进,目前最短的柱子只有3cm长,板数可达3000~4000。已能够满足一般分析的需要,并具有很高的分析速度。第3页,共83页,星期日,2025年,2月5日4、高效液相色谱仪通常在室温下操作,样品一般不须预处理,操作简便,很容易掌握。5、高效液相色谱操作的难点在于流动相的选择。可以采用纯溶剂,二元或多元混合溶剂作流动相。但流动相的选择必须遵循一定的规律,并以科学的方法优选。6、高效液相色谱技术也存在一些问题。柱子价格昂贵,要消耗大量的溶剂,而且许多溶剂对人体是有害的。高效液相色谱仪的价格和损耗也比气相色谱仪高。此外,尚缺少象气相色谱中氢火焰离子化检测器那样的通用型、高灵敏度的检测手段。因此,高效液相色谱无论在技术上,在理论上,还是在应用上都处于发展阶段。第4页,共83页,星期日,2025年,2月5日二、高效液相色谱系统下图是高效液相色谱系统的示意图。 它由输液泵为核心的输液系统、进样器、柱子和检测器四个基本部分组成。实际仪器比图要复杂得多,它们可能有几个泵,几种检测器,自动进样系统,柱和检测器的温度控制系统等。第5页,共83页,星期日,2025年,2月5日1、?输液系统输液系统的作用是向柱子提供压力高,流速稳定的流动相。它以高压输液泵为核心,由溶剂储槽、过滤器、输液泵、梯度溶剂混合器等组成。为了测量系统流量和压力,在输液系统的输出通路上还安装了不同类型的传感元件。①储液槽储液槽是盛装溶剂的容器。它可以是一个普通的溶剂瓶,或是一个专门设计的储液槽,用于除去溶剂中的气体。 ②过滤器各种泵的柱塞、进样阀的阀芯加工的精密度都非常高,微小的机械杂质将导致这些部件的损坏,而不能很好的工作。同时杂质在柱头的积累还影响柱子的使用,增大柱压,因此过滤溶剂,设置过滤器是必须的。过滤器的芯子通常是一个由多孔聚四氟乙烯制成的具有一定空隙度的圆柱体,镶嵌在一个不锈钢的壳体中,
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