一株硫酸盐还原菌稀有噬菌体的筛选及应用.pdfVIP

摘要

摘要

硫酸盐还原菌（sulfate-reducingbacteria，SRB）是一类在厌氧条件下，能把硫酸盐

等含硫氧化物还原为硫化氢的细菌统称。SRB代谢产生的硫化氢，能造成微生物酸化

和金属锈蚀。目前对SRB的控制主要是采用化学杀菌剂，但化学杀菌剂的长期使用会

对人体和环境产生毒害，同时其对生物膜内的细菌作用效果极小，并且SRB也会产生

抗药性，难以获得满意的效果。噬菌体具有特异性高、繁殖力强并且能够清除生物膜

等特性，因此使用噬菌体杀菌剂可能成为杀死SRB的一种经济有效的手段，但目前关

于SRB噬菌体的相关报道甚少。

本研究从污水中筛选到一株以硫酸盐还原菌ATCC7757为宿主的噬菌体SRB7757，

研究了其生物学特性，分析了其全基因组，并对其应用效果进行了评估。透射电镜结

果显示噬菌体SRB7757具有典型的多面体头部以及可伸缩的尾部结构，头部直径约为

64nm，尾部长约114nm。其最佳感染复数MOI=0.001，特异性强。一步生长曲线表明，

SRB7757潜伏期为4h，裂解期为32h，最大爆发量为100pfu/cell。SRB7757在pH

2.0~12.0范围内均具有活性，并且经70℃处理60min后仍具有活性，表明其对强酸强

碱高温等恶劣环境具有较好的耐受性。同时SRB7757对氯仿不敏感，对Ca2+和Mg2+有

明显需求。噬菌体SRB7757为dsDNA，基因组全长142573bp，GC含量为44.29%，共

预测到ORFs206个，其中84个ORFs编码功能性蛋白，同时预测到该噬菌体含有6个

tRNA。基因组分析结果表明噬菌体SRB7757可能是Chaseviridae家族Cleopatravirinae

亚科的新噬菌体。噬菌体模拟应用实验显示，噬菌体SRB7757的添加能明显降低由宿

主细菌生长代谢而产生的硫化物产量，并且在前24h，抑制率高达92.3%。模拟腐蚀体

系运行28天后发现，添加噬菌体组金属试样表面腐蚀坑明显减少，以上结果表明噬菌

体SRB7757能有效抑制宿主细菌生长代谢引起的微生物酸化和金属腐蚀。根据

SRB7757全基因组分析结果，我们预测到两个与裂解相关的基因Lysrb8和Lysrb9并成

功将其表达，Lysrb8分子量大小约为36.66kDa，Lysrb9分子量为35.41kDa。抗菌活性

研究发现，裂解酶Lysrb8和Lysrb9均能抑制ATCC7757，同时Lysrb8还对菌株SW-3

和SRB-3具有抑制效果。

综上所述，本研究探究了噬菌体的生物学特性，基因组学信息，并测定了其抑制

金属腐蚀及硫化物产生的应用效果，同时克隆表达了噬菌体编码的裂解酶并研究了其

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西北大学硕士学位论文

抗菌活性。不仅为噬菌体及裂解酶产品的开发提供了理论支撑，还为工业生产中对

SRB的抑制提供了一种新的思路。

关键词：硫酸盐还原菌；噬菌体；微生物酸化；微生物腐蚀；噬菌体裂解酶

II

ABSTRACT

ABSTRACT

Sulfate-reducingbacteria(SRB)areakindofbacteriathatcanreducesulfateorotheroxidized

sulfidestohydrogensulfide.Andtheyarewidelyfoundinanaerobicenvironments.Thesulfides

producedbySRBaretoxicandcorrosive,whichcancausemicrobialsouringandmicrobially

inducedcorrosion(MIC).Chemical